[发明专利]用于活体外测定致肥胖风险的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测致肥胖风险的方法，尤指利用多个特定基因的单一核苷酸多型性于活体外测定致肥胖的风险的方法

背景技术

脂肪代谢与热生成(thermogenesis)的调节影响到动物利用能量的效率，而线粒体为动物体内涉及能量的位置，主要功能是产生三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)作为能量来源供给细胞利用。ATP的产生是通过内膜上的ATP合成酶进行二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)的磷酸化耦合反应而得。所谓耦合反应(coupling)是指线粒体结合磷酸化反应与质子流动(proton flow)的一种化学渗透作用。ATP生成可通过去耦合蛋白(uncoupling protein,UCP)进调节，使能量不以ATP形式储存，而是以热能的形式释放。编码去耦合蛋白的基因，主要区分为去耦合蛋白1(uncoupling protein1,UCP1)、去耦合蛋白2(uncoupling protein2,UCP2)及去耦合蛋白3(uncoupling protein3,UCP3)三种，其在人体表达的位置不同。UCP1主要表达在褐色脂肪，UCP2在各个组织都有表达，UCP3则同时表达于褐色脂肪以及骨胳肌，其功能除了参与去耦合作用外，也有调节脂肪代谢与热生成的功能。

实验中发现提高线粒体内膜外质子梯度浓度的消耗可以促进基础代谢率(Am J Physiol.1996Oct;271(4Pt1):C1380-9)，因此UCP3可调节骨胳肌线粒体内膜质子流动产生热能，影响人体基础代谢能力，并增加能量消耗，减少过多的能量转换成脂肪储存。UCP3的基因变异研究中，位在外显子3(exon3)内的rs1800006(Tyr99Tyr,T→C)变异被发现C对偶基因与法国高加索人肥胖有关，且与功能性启动子(promoter)区域内的rs1800849变异(-55C→T)有很强的连锁不平衡(linkage disequiliburium,LD)，该变异可能影响UCP3基因mRNA表达的稳定性(Diabetologia.2000Feb;43(2):245-9)。但在欧洲其他的研究中，发现rs1800006与糖尿病及胰岛素抗性有关(Horm Res.2008;69(1):31-6.Epub2007Dec4;Diabetes.2008Apr;57(4):1101-7.doi:10.2337/db07-1269.Epub2008Jan25)。因此，目前尚未有利用UCP3基因变异来判断测定致肥胖风险的技术，仍待有进一步改进的技术，以增加利用UCP3基因变异的检测准确性。

多配体蛋白聚糖(syndecan,SDC)是一种硫酸肝素蛋白聚糖(heparan sulfate proteoglycan,HSPG),主要由核心蛋白(core protein)及硫酸肝素聚糖链(heparin sulfate chain)两个部分所组成。SDC基因家族主要存在于细胞膜上，由4个成员组成(SDC1～SDC4)，其中多配体蛋白聚糖3(syndecan3,SDC3)主要表达于神经系统，包含控制食欲的下视丘。在正常小鼠禁食实验中，发现禁食状态下大脑下视丘神经细胞SDC3基因表有显著上升，推测此时SDC3可能是Agouti相关肽(Agouti-related peptide,AGRP)的共同受体，并通过AGRP结合褪黑素受体(melanocortin receptor)传递增加食欲的信号，促进摄食行为。当给予喂食时，SDC3膜外结构(ectodomain)会脱离细胞膜使α黑色素刺激荷尔蒙(α-MSH)可与褪黑素受体结合传递抑制食欲的信号。SDC3基因剔除小鼠(SDC3null mice)也发现其脂肪量低于正常小鼠，且摄食量下降，能量消耗上升，推论SDC3基因可以调节体重及身体能量的平衡。然而，在针对欧洲人种的研究结果发现SDC3的变异与肥胖发生无显著相关，再者，各个SDC3的SNP位点与肥胖发生的关联性有所不同。

基于上述可见，单独以UCP3或SDC3基因作为肥胖基因指标恐仍有争议之处，特定而言，单独利用UCP3或SDC3基因检测致肥胖风险恐仍有不准确的疑虑。

发明内容

有鉴于现有技术检测致肥胖风险的方法，仍有检测结果不准确的问题，本发明的目的在于提供一种具有提高准确率的检测致肥胖风险的方法。