[发明专利]一种基于金纳米锥聚集的圆二色信号检测DNA的方法

权利要求书

1.一种基于金纳米锥聚集的圆二色信号检测DNA的方法，其特征在于，所述方法为：将含有DNA修饰的金纳米锥的溶液与含有待检测DNA的溶液混合进行退火反应；检测圆二色光谱，当检测到退火后相比退火前在550-850nm波段出现圆二色光谱的信号增强时，说明金纳米锥发生聚集，待检测DNA与金纳米锥上修饰的DNA存在互补序列。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述圆二色光谱的信号强度与待检测DNA的浓度呈正相关，通过检测所述圆二色光谱的信号强度定量待检测DNA的浓度。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述含有DNA修饰的金纳米锥的溶液中还含有金纳米球和/或金纳米棒，且所述金纳米锥的摩尔百分含量以金纳米锥、金纳米球和/或金纳米棒的总量计为30%以上，优选50%以上，更优选70%以上，最优选90%以上。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述退火温度范围为从60-90℃任一温度降至20-50℃任一温度，优选为从60℃降至20℃。

5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述金纳米锥上修饰的DNA与金纳米锥的摩尔比为50-100：1，优选为100：1。

6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述DNA修饰的金纳米锥是巯基DNA修饰的金纳米锥，所述巯基与金通过共价键连接将DNA修饰在金纳米锥上；

优选地，所述巯基修饰在DNA的3’末端。

7.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，退火过程中所用的缓冲液体系为含0.25M氯化钠、0.01重量%十二烷基磺酸钠和0.01M的pH为7.4的磷酸盐缓冲溶液。

8.根据权利要求1-7任一项所述的方法，其特征在于，所述待检测DNA的浓度为纳摩尔级，优选为5nM至40nM。

9.根据权利要求1-8任一项所述的方法，其特征在于，所述金纳米锥是通过对制备的金纳米锥的初产物进行密度梯度离心得到的。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述金纳米锥的初产物是通过如下方法制备得到的：

（1）在20-25℃条件下，将柠檬酸钠和HAuCl₄水溶液混合，加入新制备的NaBH₄溶液，得到金晶种；

（2）将十六烷基三乙基溴化铵、HAuCl₄和硝酸银溶液混合均匀配成生长溶液，加入抗坏血酸溶液后搅拌均匀，然后加入步骤（1）中所述金晶种，在20-25℃条件下静置生长20-24小时，得到所述金纳米锥的初产物；

优选地，所述步骤（1）中HAuCl₄、NaBH₄、柠檬酸钠和水的摩尔比为1:（1-1.5）:（2-3）:（400-500）；

优选地，所述步骤（2）中HAuCl₄、十六烷基三乙基溴化铵、硝酸银、抗坏血酸和水的摩尔比为1：（240-260）：（0.13-0.16）：（0.13-0.16）：（1200-1250）。