[发明专利]一种纯化特利加压素的方法

权利要求书

1.一种纯化特利加压素的方法，该方法使用C18反相填料，流动相采用含有表面活性剂的离子对试剂，可使成品特利加压素中的杂质[βAsp⁸]-特利加压素含量降低到0.1 %以下，其特征在于，所述方法包括以下步骤： 

步骤1，将特利加压素粗品用水溶解，调节pH到3-4；

步骤2，使用含有表面活性剂的离子对流动相A冲洗C18反相填料柱；

步骤3，将步骤1溶液载入C18反相填料中；

步骤4，梯度程序为：洗脱梯度的初始状态流动相B为5 %，保持5 min，然后60 min内将流动相B比例增至30 %，收集部分目的峰洗脱馏分；

步骤5，纳滤膜脱盐后，经过冷冻干燥得到纯品特利加压素；

其中，C18反相填料柱为（10 μm，50 mm ×250 mm)；

流动相A：5 mmol/L磷酸二氢铵+25 mmol/L 表面活性剂（使用磷酸调pH：3-4）； 

流动相B：乙腈；

梯度程序为：初始状态流动相B为5 %，保持5 min，然后60 min内将流动相B比例增至30 %，收集部分目的峰洗脱馏分；流速为：80 mL/min；检测波长为220 nm。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是：包括以下步骤：

步骤1，样品处理：

将1.00 g特利加压素粗肽溶解于50-100 mL纯净水中，使用磷酸调节pH为3.5±0.2；

步骤2，平衡

使用含有表面活性剂的离子对流动相A冲洗C18反相填料柱5 min；

步骤3，上样

将样品溶液载入制备柱中；

步骤4，洗脱

梯度程序为：梯度的初始状态流动相B为5 %，保持5 min，然后60 min内将流动相B比例增至30 %；流速为：80 mL/min；检测波长为220 nm；收集目的峰纯度大于99.80 %的洗脱馏分，中控检测：用C18 （5 um，150×3.0mm）色谱柱；以硫酸铵缓冲液（取硫酸铵1.32 g，加水2000 mL，加硫酸0.4 mL）－甲醇（1440：320）为流动相A，硫酸铵缓冲液－甲醇（550：240）为流动相B；流速为0.6m1/min；柱温为30 ℃；检测波长为210 nm；洗脱梯度的初始状态为15 ％流动相B，保持35 min，然后在20 min内将流动相B升至100 ％，保持5 min，然后在1 min内回到初始状态，保持19 min；

步骤5，脱盐

将洗脱馏分经过纳滤膜脱盐，收集截留液；

步骤6，冻干

将截留液经过冻干得到纯品特利加压素。

3.如权利要求1所述的表面活性剂，其特性在于该表面活性剂为：己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、癸烷磺酸钠、十二烷基磺酸钠的中的一种，优选癸烷磺酸钠。