[发明专利]一种应用高效液相色谱法同时测定植物蜕皮激素类物质的方法无效
申请号: | 201410057026.X | 申请日: | 2014-02-15 |
公开(公告)号: | CN103837615A | 公开(公告)日: | 2014-06-04 |
发明(设计)人: | 宋雯雯;段方猛 | 申请(专利权)人: | 青岛农业大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266109 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 应用 高效 色谱 同时 测定 植物 蜕皮 激素类 物质 方法 | ||
1.一种应用高效液相色谱法同时测定植物蜕皮激素类物质的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)分别制备20-羟基蜕皮甾酮、α-蜕皮甾酮、2-脱氧-20-羟基蜕皮甾酮和7-脱氢胆固醇的标准溶液和混合标准溶液;
(2)取上述制备的标准液母液,按照倍比稀释的方法,配成5种浓度,稀释溶剂为甲醇,经0.45μM微孔滤膜过滤后,各取20μL进样分析;
(3)进行高效液相色谱分析:
实验仪器:美国沃特世液相色谱仪的系统:四元输液泵P4000、在线真空脱气机、全自动进样器AS1000、二极管阵列检测器UV6000LP;
色谱条件:采用YMC250×4.6mm,S-5μm色谱柱;采用甲醇-水的流动相进行梯度洗脱,梯度洗脱程序为0-30min,甲醇30%→95%;30-40min,甲醇95%→100%;40-60min,甲醇100%;60-65min,甲醇100%→30%;65-70min,甲醇30%;流速:1.0mL/min,进样量:20μL,柱温:38℃;波长:260nm,扫描波长:200-600nm;
(4)定性定量分析
将上述5种倍比浓度的20-羟基蜕皮甾酮、α-蜕皮甾酮、2-脱氧-20-羟基蜕皮甾酮和7-脱氢胆固醇的混合标准溶液进样检测,每个浓度进样3次,进行相关性回归分析。
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