[发明专利]一种应用高效液相色谱法同时测定植物蜕皮激素类物质的方法无效
| 申请号： | 201410057026.X | 申请日： | 2014-02-15 |
| 公开（公告）号： | CN103837615A | 公开（公告）日： | 2014-06-04 |
| 发明（设计）人： | 宋雯雯;段方猛 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266109 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 应用 高效 色谱 同时 测定 植物 蜕皮 激素类 物质 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种应用高效液相色谱法同时测定植物蜕皮激素类物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)分别制备20-羟基蜕皮甾酮、α-蜕皮甾酮、2-脱氧-20-羟基蜕皮甾酮和7-脱氢胆固醇的标准溶液和混合标准溶液；
(2)取上述制备的标准液母液，按照倍比稀释的方法，配成5种浓度，稀释溶剂为甲醇，经0.45μM微孔滤膜过滤后，各取20μL进样分析；
(3)进行高效液相色谱分析：
实验仪器：美国沃特世液相色谱仪的系统：四元输液泵P4000、在线真空脱气机、全自动进样器AS1000、二极管阵列检测器UV6000LP；
色谱条件：采用YMC250×4.6mm，S-5μm色谱柱；采用甲醇-水的流动相进行梯度洗脱，梯度洗脱程序为0-30min，甲醇30％→95％；30-40min，甲醇95％→100％；40-60min，甲醇100％；60-65min，甲醇100％→30％；65-70min，甲醇30％；流速：1.0mL／min，进样量：20μL，柱温：38℃；波长：260nm，扫描波长：200-600nm；
(4)定性定量分析
将上述5种倍比浓度的20-羟基蜕皮甾酮、α-蜕皮甾酮、2-脱氧-20-羟基蜕皮甾酮和7-脱氢胆固醇的混合标准溶液进样检测，每个浓度进样3次，进行相关性回归分析。
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