[发明专利]一种金色链霉菌发酵生产金霉素的新型培养基和培养方法无效
申请号: | 201410057535.2 | 申请日: | 2014-02-20 |
公开(公告)号: | CN103773831A | 公开(公告)日: | 2014-05-07 |
发明(设计)人: | 任勇;王义 | 申请(专利权)人: | 宁夏泰瑞制药股份有限公司 |
主分类号: | C12P29/00 | 分类号: | C12P29/00;C12R1/49 |
代理公司: | 宁夏专利服务中心 64100 | 代理人: | 徐淑芬 |
地址: | 750101 宁夏*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 金色 霉菌 发酵 生产 金霉素 新型 培养基 培养 方法 | ||
1. 一种金色链霉菌发酵生产金霉素的新型培养基,包括种子培养基和发酵培养基组成,其特征在于所述种子培养基和发酵培养基中均含有土霉素菌渣。
2. 按照权利要求1所述的金色链霉菌发酵生产金霉素的新型培养基,其特征在于所述土霉素菌渣来源于土霉素发酵液经板框过滤得到的固体产物,质量要求为:氨基氮含量≥20%;水分≤6%;灰分≤5%;碳水化合物≥10%;干渣颗粒通过60目筛的数量≥85%。
3. 按照权利要求1或2所述的金色链霉菌发酵生产金霉素的新型培养基,其特征在于所述种子培养基组成为:乳清粉6~10g/L、麦芽糊精9~12g/L、低温黄豆饼粉6~9g/L、玉米浆8~10ml/L、土霉素菌渣10~15g/L、硫酸铵1~3g/L、轻质碳酸钙1~3g/L、磷酸二氢钾0.5~1.5g/L,玉米油5~10ml/L。
4. 按照权利要求1或2所述的金色链霉菌发酵生产金霉素的新型培养基,其特征在于所述发酵培养基组成为:乳清粉8~12g/L、麦芽糊精12~15g/L、低温黄豆饼粉8~12g/L、玉米浆9~13ml/L、土霉素菌渣15~20g/L、硫酸铵1~3g/L、轻质碳酸钙1~3g/L、磷酸二氢钾0.5~1.5g/L、玉米油10~15ml/L、氯化钠0.9~1.1g/L、硫酸镁0.4~0.8g/L、硫酸亚铁0.2~0.5g/L。
5. 一种利用权利要求1至4所述培养基发酵生产金霉素的培养方法,其特征在于其工艺步骤为:
1) 采用平行种子发酵模式进行种子培养:首先将种子培养基灭菌,冷却,并用无菌空气保压,然后在火焰保护下,将已经培养好的金色链霉菌母瓶发酵液接入种子罐进行培养,接种量控制在种子培养基体积的0.1~0.2%;
2) 发酵培养:先将发酵培养基灭菌,冷却,并用无菌空气保压,然后将采用平行种子发酵模式培养的种子液移入发酵罐进行发酵培养。
6. 按照权利要求5所述的培养方法,其特征在于所述种子培养条件为:罐压0.05~0.06MPa;罐温31~33℃;空气流量:0~12h,20~30m3/h;12h~移种:50~60m3/h;搅拌转速80~100r/min。
7. 按照权利要求5所述的培养方法,其特征在于所述发酵培养条件为:
a 培养基初始pH:发酵培养基灭菌后pH控制在6~7;
b 温度:采用变温控制方法,0~20h:培养温度29~31℃;20h~发酵结束:培养温度31~33℃;
c 搅拌转速:100~130r/min;
d 压力控制:罐压0.05~0.06MPa;
e pH控制:发酵过程中pH控制在5.5~6.5;
f 无菌检查:发酵过程中进行菌检,要求无其它杂菌;
g 空气流量:0~20h:150~200m3/h;20h~发酵结束:250~300m3/h;
h 溶氧控制:
发酵前5h内,不控制溶氧;
6~20h,溶氧控制在80%以上;
21~60h,溶氧控制在20%以上;
61~发酵结束:溶氧控制在40%以上。
8. 按照权利要求5所述的培养方法,其特征在于所述种子培养过程中的移种条件为:种子培养结束,其菌体浓度15~25%;pH值5.5~6.5;无其它杂菌污染;培养时间15~18h。
9. 按照权利要求5所述的培养方法,其特征在于发酵培养停止条件为:
a 氨基氮:10~50mg/100ml;
b 化学效价:>33000u/mL;
c pH:5.5~6.5;
d 还原糖:<2g/L;
e 菌体浓度:35~40%;
f发酵周期:培养时间90~95h。
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