[发明专利]促进肺癌细胞凋亡的组合药物、药物制剂以及检测方法

权利要求书

1.一种促进肺癌细胞凋亡的组合药物，其特征在于，所述肺癌细胞选自非小细胞肺癌细胞株A549，所述组合药物由3-[2,4-双((3S)-3-甲基吗啉-4-基)吡啶并[5,6-e]嘧啶-7-基]-N-甲基苯甲酰胺以及产生糖酵解作用的2-脱氧-D-葡萄糖组成。

2.如权利要求1所述的组合药物，其特征在于，所述组合药物中所述3-[2,4-双((3S)-3-甲基吗啉-4-基)吡啶并[5,6-e]嘧啶-7-基]-N-甲基苯甲酰胺与所述2-脱氧-D-葡萄糖的摩尔浓度比为1:1。

3.一种促进肺癌细胞凋亡的药物制剂，其特征在于，以促进肺癌细胞凋亡的组合药物作为活性成分，并辅以可接受的要用载体；

所述肺癌细胞选自非小细胞肺癌细胞株A549；

所述组合药物由3-[2,4-双((3S)-3-甲基吗啉-4-基)吡啶并[5,6-e]嘧啶-7-基]-N-甲基苯甲酰胺以及产生糖酵解作用的2-脱氧-D-葡萄糖组成。

4.如权利要求3所述的药物制剂，其特征在于，所述组合药物中所述3-[2,4-双((3S)-3-甲基吗啉-4-基)吡啶并[5,6-e]嘧啶-7-基]-N-甲基苯甲酰胺与所述2-脱氧-D-葡萄糖的摩尔浓度比为1:1。

5.如权利要求3所述的药物制剂，其特征在于，所述制剂为口服液、胶丸、口服混悬液、固体分散体、胶囊、缓释剂、颗粒剂、片剂、注射剂、软膏、贴剂或植入剂。

6.一种肺癌细胞凋亡的检测方法，其特征在于，所述肺癌细胞选自非小细胞肺癌细胞株A549，所述方法包括：

采用促进肺癌细胞凋亡的组合药物对所述肺癌细胞进行处理，同时采用所述组合药物中的两种组分分别对所述肺癌细胞进行处理，与未处理的肺癌细胞组成四组对比样品，所述组合药物由3-[2,4-双((3S)-3-甲基吗啉-4-基)吡啶并[5,6-e]嘧啶-7-基]-N-甲基苯甲酰胺以及产生糖酵解作用的2-脱氧-D-葡萄糖两种组分组成；

针对所述四组对比样品，进行预处理，所述预处理包括：采用胰酶消化所述肺癌细胞，并采用含有胎牛血清的培养基终止对肺癌细胞的消化，将终止消化后的肺癌细胞进行离心，弃除上清液；

对进行预处理后的四组样品分别进行流式细胞仪检测，并比对流式细胞仪的检测结果；

对进行预处理后的四组样品分别进行凋亡蛋白表达的检测，并比凋亡蛋白表达的检测结果。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述组合药物中所述3-[2,4-双((3S)-3-甲基吗啉-4-基)吡啶并[5,6-e]嘧啶-7-基]-N-甲基苯甲酰胺与所述2-脱氧-D-葡萄糖的摩尔浓度比为1:1。

8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，对进行一次处理后的四组样品分别进行流式细胞仪检测的步骤包括：

采用预冷的磷酸盐缓冲液重悬细胞并转入无菌的离心管中；

进行细胞计数，提取预设个数的肺癌细胞细胞，离心并弃除上清液；

采用磷脂结合蛋白与异硫氰酸荧光素的结合液重悬细胞，再加入所述结合液混匀，在室温下避光孵育后离心并弃除上清液；

再次加入所述结合液重悬细胞，加入碘化丙啶染色液混匀，冰浴避光放置后，进行流式细胞仪检测；

对进行一次处理后的四组样品分别进行凋亡相关蛋白的表达的步骤包括：

收集细胞沉淀，并提取蛋白；

采用蛋白质印迹法检测所述四组样品凋亡相关蛋白的表达。