[发明专利]实现胚胎装入冷冻载体的系统、冷冻载体及冷冻保存方法有效
申请号: | 201410062556.3 | 申请日: | 2014-02-24 |
公开(公告)号: | CN104855371B | 公开(公告)日: | 2019-05-21 |
发明(设计)人: | 张孝东;黄国宁 | 申请(专利权)人: | 张孝东 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 张超 |
地址: | 400000 重庆*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 实现 胚胎 装入 冷冻 载体 系统 保存 方法 | ||
1.一种实现胚胎装入冷冻载体的系统,其特征在于,包括:培养皿和卵子或胚胎玻璃化冷冻载体,其中该卵子或胚胎玻璃化冷冻载体包括:
载体本体,与所述载体本体一体相连、拖拉所述载体本体的拖杆,其中所述载体本体为网格承载体,所述网格承载体在纵截面上具有弧度;
所述卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体的弧度最底面贴合培养皿底部,借助卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的拖杆,该卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体随拖杆在培养皿底部移动使网格承载体中承载的卵子或胚胎周围的冷冻液沿拖动方向转移到培养皿底部;其中,所述弧度为半圆弧;网格承载体的网格孔径为80-100um。
2.一种卵子或胚胎玻璃化冷冻保存方法,包括:卵子或胚胎平衡操作步骤、玻璃化冷冻液清洗步骤、胚胎装入载体步骤,其特征在于,所述胚胎装入载体步骤包括有:
步骤11:将卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体置于15%乙二醇+15%二甲基亚砜的玻璃化冷冻液中进行浸润;
步骤12:将完全侵润的卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体放置在培养皿内;
步骤13:将玻璃化冷冻操作步骤中的清洗后的胚胎吸入玻璃吸管,再转移至卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体上,并将玻璃吸管内所有剩余液体全部吹打到网格承载体表面;
步骤14:拖动卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的拖杆,将该卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体在培养皿底部移动,使网格承载体上胚胎周围的冷冻液沿拖动方向转移到培养皿底部;
步骤15:拖动完成后,将卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体置于液氮中,完成冷冻操作。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤12中将卵子或胚胎玻璃化冷冻载体的网格承载体放置在培养皿内是以网格承载体的弧度最底面贴合培养皿底部。
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,卵子或胚胎平衡操作步骤具体为:
将胚胎置于7.5%乙二醇+7.5%二甲基亚砜的培养液中放置10分钟左右;期间胚胎先经历皱缩的脱水;再经历从皱缩状态恢复到原大小的水分子被冷冻保护剂置换的过程。
5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,玻璃化冷冻液清洗步骤具体为:将胚胎置于15%乙二醇+15%二甲基亚砜的玻璃化冷冻液中,清洗5-10遍直至卵子或胚胎平衡操作步骤中包裹在胚胎周围的低浓度平衡液清洗干净。
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