[发明专利]基于纳米磁珠的核酸提取纯化方法及试剂盒有效
| 申请号： | 201410062784.0 | 申请日： | 2014-02-25 |
| 公开（公告）号： | CN103820431A | 公开（公告）日： | 2014-05-28 |
| 发明（设计）人： | 李明;李红东;苗保刚;彭年才;倪晓龙;李政 | 申请（专利权）人： | 苏州天隆生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 苏州慧通知识产权代理事务所(普通合伙) 32239 | 代理人： | 安纪平 |
| 地址： | 215123 江苏省苏州市工业园*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 纳米 核酸 提取 纯化 方法 试剂盒 | ||
1.一种基于纳米磁珠的核酸提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)在生物样品中加入裂解缓冲液，裂解分离出所述生物样品中的核酸DNA/RNA，所述核酸DNA/RNA与所述裂解缓冲液中的纳米磁珠结合，在外部磁场作用下，形成磁珠-核酸复合物；
2)向所述磁珠-核酸复合物中加入洗涤缓冲液，洗涤去除磁珠-核酸复合物上的杂质，在外部磁场作用下，收集洗涤后的磁珠-核酸复合物；
3)向所述洗涤后的磁珠-核酸复合物中加入洗脱缓冲液，将结合在纳米磁珠上的核酸DNA/RNA洗脱下来回收，即得到纯化的核酸DNA/RNA。
2.根据权利要求1所述的基于纳米磁珠的核酸提取纯化方法，其特征在于，所述裂解缓冲液包括：碘化钠1.5～3M，盐酸胍2～3M，EDTA1～10mM，Tween-203％，纳米磁珠8％，SDS2％，异丙醇35％，所述裂解缓冲液的PH值＝7.4；
所述洗涤缓冲液包括：EDTA1～10mM，Tris-cl150mM，乙醇75％，所述洗涤缓冲液的PH值＝6.4；
所述洗脱缓冲液采用1mM氢氧化钠液。
3.根据权利要求1所述的基于纳米磁珠的核酸提取纯化方法，其特征在于，所述生物样品包括有细胞液体样品和无细胞液体样品。
4.根据权利要求3所述的基于纳米磁珠的核酸提取纯化方法，其特征在于，所述有细胞液体样品包括细胞、全血、动物组织匀浆液。
5.根据权利要求3所述的基于纳米磁珠的核酸提取纯化方法，其特征在于，所述无细胞液体样品包括血清、血浆、组织提取液、拭子洗液、尿液、病毒培养液。
6.根据权利要求1或2所述的基于纳米磁珠的核酸提取纯化方法，其特征在于，所述纳米磁珠为超顺磁性氧化硅纳米磁性微珠，直径为100√800nm。
7.一种基于纳米磁珠的核酸提取纯化试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中的组分包括裂解缓冲液、洗涤缓冲液和洗脱缓冲液，所述裂解缓冲液包括：碘化钠1.5～3M，盐酸胍2～3M，EDTA1～10mM，Tween-203％，纳米磁珠8％，SDS2％，异丙醇35％；所述洗涤缓冲液包括：EDTA1～10mM，Tris-cl150mM，乙醇75％；所述洗脱缓冲液采用1mM氢氧化钠液。
8.根据权利要求7所述的基于纳米磁珠的核酸提取纯化方法，其特征在于，所述裂解缓冲液的PH值＝7.4。
9.根据权利要求7所述的基于纳米磁珠的核酸提取纯化方法，其特征在于，所述洗涤缓冲液的PH值＝6.4。
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