[发明专利]印度芽孢杆菌的发酵培养方法无效
申请号: | 201410063650.0 | 申请日: | 2014-02-25 |
公开(公告)号: | CN104099264A | 公开(公告)日: | 2014-10-15 |
发明(设计)人: | 张东升;李华;刘洋;宋坚;王震;毛东东 | 申请(专利权)人: | 大连海洋大学;张东升 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/07 |
代理公司: | 大连非凡专利事务所 21220 | 代理人: | 高学刚 |
地址: | 116000 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 印度 芽孢 杆菌 发酵 培养 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种菌的发酵培养方法,特别是一种印度芽孢杆菌的发酵培养方法。
背景技术
印度芽孢杆菌最早(2004年)发现于印度一淡水水域,在2009年首次发现它存在于海水中,2010年发现其细胞内含有胃液不能破坏的类胡罗卜素,可安全地用做食品添加剂;目前实验室培养印度芽孢杆菌主要利用常规实验用的牛肉膏蛋白胨或是2216E培养基,用这种常规培养基大量培养印度芽孢杆菌的成本较高,不利于印度芽孢杆菌的推广和应用。因此现在业内人员期望找到一种成本低廉的培育印度芽孢杆菌的方法。
发明内容
本发明是为了解决现有技术所存在的上述不足,提出一种操作简便,成本低廉,适合于推广和应用的印度芽孢杆菌的发酵培养方法。
本发明的技术解决方案是:一种印度芽孢杆菌的发酵培养方法,其特征在于:所述的方法按照以下步骤进行:
向pH为7-7.5的培养基中接种印度芽孢杆菌,接种量为1-2%,培养温度为25-30℃,装液量为容器的20-40%,摇床转速为150-170r/min,培养时间为48小时,培养基为海水溶液,其中豆粕含量为0.2-0.4g/100ml,麦麸含量为0.2-0.4g/100ml,酵母膏含量为0.1g/100ml。
本发明同现有技术相比,具有如下优点:
本发明所公开的印度芽孢杆菌的发酵培养方法,其操作简单,行之有效。现在业内并没有大规模发酵培养印度芽孢杆菌的方法,传统的实验室培养发放需要使用蛋白胨和牛肉膏作为培养基,其价格较为昂贵,不利于印度芽孢杆菌的大规模、批量化培养,而本发明则公开了一种价格低廉、应用广泛的原料作为培养基,按照合适的比例和条件,可以培养出细胞数量较高、类胡萝卜素含量较高的印度芽孢杆菌,其成本相比于传统的培养基可降低百余倍。因此可以说这种方法具备了多种优点,特别适合于在本领域中推广应用,其市场前景十分广阔。
具体实施方式
下面将说明本发明实施例的具体实施方式。一种印度芽孢杆菌的发酵培养方法,按照以下步骤进行:首先配置培养基,培养基为以海水为基础的海水溶液,其中豆粕含量为0.2-0.4g/100ml,麦麸含量为0.2-0.4g/100ml,酵母膏含量为0.1g/100ml;配置完成后将培养基的pH值调节至7-7.5,然后向培养基中接种印度芽孢杆菌,这里所选用的印度芽孢杆菌为印度芽孢杆菌L15,该菌种已于2013年保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.1.12725。接种的印度芽孢杆菌L15的浓度为108cfu/ml,接种量为1-2%,培养温度为25-30℃,接种后的培养基放入发酵罐等容器中,其装液量为容器的20-40%,将容器放置在摇床上,摇床的转速为150-170r/min,培育48小时,培育出印度芽孢杆菌L15的数量最高可达1012cfu/ml。
[0007] 印度芽孢杆菌L15菌株保藏日期:2013年11月1日;
分类命名:Bacillus indius;
保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC);
保藏单位地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号
保藏号:CGMCC No. 1.12725。
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