[发明专利]H9亚型禽流感病毒和鸭坦布苏病毒二重RT-PCR检测试剂盒有效
| 申请号： | 201410066408.9 | 申请日： | 2014-02-26 |
| 公开（公告）号： | CN103789454A | 公开（公告）日： | 2014-05-14 |
| 发明（设计）人： | 谢芝勋;赵虹;谢丽基;刘加波;范晴;庞耀珊;罗思思;邓显文;谢志勤 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 45104 | 代理人： | 杨立华 |
| 地址： | 530001 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | h9 禽流感 病毒 鸭坦布苏 二重 rt pcr 检测 试剂盒 | ||
1.H9亚型禽流感病毒和鸭坦布苏病毒二重RT-PCR检测引物组，其特征在于包括两对特异性引物，分别是引物1和2、引物3和4，它们分别具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.4的碱基序列。
2.根据权利要求1所述的H9亚型禽流感病毒和鸭坦布苏病毒二重RT-PCR检测引物组，其特征在于：所述引物1、引物2、引物3、引物4的摩尔比为0.5-1∶0.5-1∶1∶1。
3.根据权利要求2所述的H9亚型禽流感病毒和鸭坦布苏病毒二重RT-PCR检测引物组，其特征在于：所述引物1、引物2、引物3、引物4的摩尔比为1∶1∶1∶1。
4.权利要求1所述H9亚型禽流感病毒和鸭坦布苏病毒二重RT-PCR检测引物组在二重PCR扩增方面的应用，其特征在于：所述二重PCR扩增的退火温度为50.0-60.1℃。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述二重PCR扩增的退火温度为54.5℃。
6.一种H9亚型禽流感病毒和鸭坦布苏病毒二重RT-PCR检测试剂盒，其特征在于该试剂盒含有以下试剂：
A液：PCR反应液，含2×Taq PCR Mix(购自全式金.AS111-12)、H9AIV上下游引物、TMUV上下游引物、ddH2O，H9AIV上下游引物分别是引物1和2，TMUV上下游引物分别是引物3和4，引物1至4分别具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.4的碱基序列；
B液：H9AIV+TMUV模板，作为阳性对照；
C液：ddH2O，作为阴性对照。
7.根据权利要求6所述的H9亚型禽流感病毒和鸭坦布苏病毒二重RT-PCR检测试剂盒，其特征在于：所述PCR反应液含2×Taq PCR Mix25μL、H9AIV上下游引物各0.8μl、TMUV上下游引物各1.2μl、ddH2O1.0μL，其中各引物浓度均为50μmol/mL；所述B液含H9AIV+TMUV模板各10μL，所述C液为2μL ddH2O。
8.权利要求7所述H9亚型禽流感病毒和鸭坦布苏病毒二重RT-PCR检测试剂盒在二重PCR扩增方面的应用，其特征在于：所述二重PCR扩增的退火温度为50.0-60.1℃。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述二重PCR扩增的退火温度为54.5℃。
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