[发明专利]一种海豚链球菌细菌素及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及免疫学领域，具体的说是一种海豚链球菌细菌素及其应用。

背景技术

细菌素(Bacteriocin)是由细菌在代谢过程中通过核糖体合成产生的一类具有抑菌活性的多肽、蛋白质或蛋白质复合物。细菌素通常由革兰氏阳性菌产生并可以抑制其他的革兰氏阳性菌，如乳球菌、葡萄杆菌、利斯特氏杆菌等，对大多数的革兰氏阴性菌、真菌等均没有抑制作用。这些广谱抗菌的细菌素对抑制食品、乳制品在保藏及发酵过程中所产生的有害菌有着重要的作用。细菌素可以和敏感细菌的膜表面受体分子相互作用，在细胞膜上形成小孔，进而杀死细菌。然而，细菌素对动物免疫应答方面的调控作用则尚未见报道。

发明内容

本发明目的在于提供一种海豚链球菌细菌素的免疫调控应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种海豚链球菌细菌素，细菌素为序列表SEQ ID No.1中的氨基酸序列所示。

海豚链球菌细菌素的应用，所述细菌素蛋白用于制备抑制鱼类免疫细胞的免疫活性抑制剂。

所述细菌素蛋白用于制备抑制大菱鲆免疫细胞的免疫活性抑制剂。

本发明具有如下优点：本发明的海豚链球菌细菌素能够明显抑制鱼类免疫细胞的活性。

附图说明

图1为本发明实施例提供的纯化的细菌素蛋白。其中，泳道1，分子量标准；泳道2,细菌素。

图2为本发明实施例提供的细菌素对鱼类免疫细胞（即大菱鲆单核细胞）的免疫抑制效应图。其中，A为细胞的呼吸爆发活性；B为细胞的酸性磷酸酶活性。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步说明。实施例旨在对本发明进行举例描述，而非以任何形式对本发明进行限制。

在本发明实施例中所涉及到的常规性实验方法均采用如下方法：

1.质粒提取、DNA(PCR)产物纯化、DNA片段从凝胶中回收皆使用“天根生化科技(北京)有限公司”的相应试剂盒。

2.大肠杆菌用Hanahan方法（Sambrook and Russell:Molecular Cloning:A Laboratory Mannual.Cold Spring Harbor Laboratory Press2001）；酵母转化按Invitrogen公司的方法（Catalog no.V175-20）；聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS－PAGE）按照Sambrook and Russell:Molecular Cloning:A Laboratory Mannual.Cold Spring Harbor Laboratory Press2001。

3.所有限制性内切酶和连接酶皆购自于“纽英伦生物技术有限公司”，北京。

实施例1

本发明的海豚链球菌细菌素(命名为Sil)为序列表SEQ ID No.1中的氨基酸序列。

序列表SEQ ID No.1为：

MKKISKIWAVGLVAASLSFGSIAYAESISVAGGTWNYGYGVGQAYSHYKHDYNNHGAKVVNSNNGVKDYKNAGPGVWAKASIGTVWDPATFYYNPTGFYSN

（a）序列特征：

●长度：101

●类型：氨基酸序列

●链型：单链

●拓扑结构：线性

（b）分子类型：蛋白质

（c）假设：否

（d）反义：否

（e）最初来源：海豚链球菌

结构特点：该蛋白预期含有一个信号肽（氨基酸1－25）。

实施例2

细菌素Sil重组蛋白的制备

1）表达Sil重组蛋白的质粒pSil的构建：