[发明专利]红椿组织培养培养基

说明书

技术领域

本发明涉及组织培养基，尤其涉及一种红椿组织培养培养基。

背景技术

红椿（Toona ciliata Roem.）又名红楝子、印度椿、麦荣，楝科香椿属，半常绿乔木，国家Ⅱ级重点保护野生植物，是我国热带、亚热带地区的珍贵速生用材树种，主要分布于广东、广西、云南、贵州和安徽等省区。1973年在皖南泾县首次发现有少量天然分布，其木材为上等家具用材，素有“中国桃花心木”之称。红椿还是一种尚未被开发利用的药用植物。近年来的研究发现,红椿提取物具有抗菌、抗病毒、灭螺及抗疟等多种生物活性。目前该树种自然资源现存稀少，且人为破坏较为严重，若不加以保护，将陷于濒临灭绝的境地。

目前红椿的常规繁育以种子繁殖为主，难以保持母本的优良性状，且其种子易丧失活力，繁殖速度较慢。通过组织培养的方法可以解决其优质种苗繁殖问题。目前，还未见有红椿组织培养方面的相关报道。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种红椿组织培养培养基基配方，该培养基包括继代培养基和生根培养基，其中：

每升（L）继代培养基的组分及各组分的含量如下：

（1）大量元素：硝酸钾1267mg/L、硝酸铵1100mg/L、二水氯化钙293mg/L、七水硫酸镁247mg/L、磷酸二氢钾113mg/L、七水硫酸亚铁27.8mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L；

（2）微量元素：四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L；

（3）有机物：肌醇100mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸吡哆醇（VB6）0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素（VB1）0.1mg/L；

（4）植物生长调节剂：6-苄基腺嘌呤0.4-0.8mg/L、萘乙酸0.1-0.3mg/L、赤霉素0.6-1.0mg/L；

余量为蒸馏水。

每升（L）生根培养基的组分及各组分的含量如下：

（1）大量元素：硝酸钾950mg/L、硝酸铵825mg/L、二水氯化钙220mg/L、七水硫酸镁185mg/L、磷酸二氢钾85mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L、七水硫酸亚铁27.8mg/L；

（2）微量元素：四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L；

（3）有机物：肌醇100mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸吡哆醇（VB6）0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素（VB1）0.1mg/；

（4）植物生长调节剂：吲哚乙酸0.4-0.8mg/L；

余量为蒸馏水。

本发明红椿组织培养基中的继代、生根培养基的配制方法为：

1母液的配制与保存

1.1为便于取样，宜先配制各种母液，分为大量元素母液、微量元素母液、有机物母液和各种植物生长调节剂母液。蔗糖、琼脂不宜配成母液，需要时直接称样；

1.2大量元素母液浓度成100倍溶液，有机物、微量元素母液配成200倍溶液，植物生长调节试剂母液的浓度配成1mg/ml；

1.3母液选用无菌的蒸馏水、去离子水或超纯水配制，大量生产时用煮沸过的水；

1.4配制大量元素母液时，每个组分应单独溶解，后按氮、钙、镁、磷的顺序逐个混合，否则容易引起沉淀；

1.5微量元素、有机物、植物生长调节剂母液应用棕色瓶装好并置于冰箱中保存；

1.6母液配制后应及时使用，贮存时间不宜超过1个月；

1.7发现母液有沉淀，或有微生物生长，或有藻类生长，应废弃不用。

2培养基的配制

2.1依照培养基配方，按比例量取各种母液；

2.2在定量容器内放入准备配制培养基总量的约1/2以上的纯净水，并加入适量的糖，然后边搅拌边逐一加入所需量的母液；

2.3琼脂可加热熔化后加入，如有搅拌设备时也可直接加入琼脂粉，然后用纯净水补足所需配制培养基的总量，搅拌均匀即可；

2.4培养基中的糖，在大量组培苗生产中，一般可用市售白砂糖，但最好是用蔗糖而不要用甜菜糖；

2.5用1.0摩尔/升的盐酸或1.0摩尔/升的氢氧化钠调节培养基的pH值至5.8；