[发明专利]扁桃斑鸠菊组织培养培养基

说明书

技术领域

本发明涉及组织培养基，尤其涉及一种扁桃斑鸠菊组织培养培养基。

背景技术

扁桃斑鸠菊(Vernonia amygdalina Del.)，又名桃叶斑鸠菊、杏叶斑鸠菊、神奇树、苦树、南非树、南非叶，为菊科斑鸠菊属植物，原产于非洲，最多见于西非。目前已知的菊科斑鸠菊属植物约1000种，多属于草本、木质藤本或乔木，主要生长于热带地区。我国已发现约30种，有糙叶斑鸠菊、柳叶斑鸠菊、驱虫斑鸠菊、夜香牛等，主要方分布于西南至东南、台湾、新疆等地。扁桃斑鸠菊多为2-5cm高的小灌木，喜光，宜在潮湿环境中生长，也耐干旱，适应所有土壤类型。扁桃斑鸠菊叶子可以安全食用，在尼日利亚等地被当作一种蔬菜。其叶片具有独特的气味和苦涩感，因而常被称为苦叶，可入药。

扁桃斑鸠菊应用较广泛，已在药品、食品级工业等领域得到广泛应用。在治疗肿瘤尤其是防治乳腺癌、降血压方面极具潜力。目前研究主要集中在抗肿瘤活性、对免疫系统影响、皮肤病治疗和抗感染等方面。此外，还广泛应用于抗疟、抗血栓、调理肠胃、治疗发烧、杀菌消毒等方面。其主要活性成分有皂苷、生物碱、萜类、类固醇、香豆素类、黄酮类、酚酸类、木酚素、蒽醌类和倍半萜等。目前已从中分离5类共32种化合物。

扁桃斑鸠菊，在东南亚及台湾等地民间应用较多，而中国大陆则相对比较陌生，近年来两广地区陆续有引进。作为抗癌草药的扁桃斑鸠菊在药用成分提取、保健品开发和食疗方面具有极大的开发潜力。采用组织培养技术建立其无性快繁技术体系，相对常规扦插技术，可以提高其繁殖系数、实现周年生产、保障种苗的品质，并且有利于种植资源保存，加快推进其产业化和标准化生产，也为更深层次的研究提供了新的技术平台。同属植物驱虫斑鸠菊的组培快繁体系已有报道，而扁桃斑鸠菊的组培快繁技术研究尚未见报道。发明内容

本发明的目的是建立一套扁桃斑鸠菊高效的组织培养快速繁殖技术体系，提供一种扁桃斑鸠菊组织培养培养基，该培养基包括继代培养基和生根培养基，其中：

每升（L）继代培养基的组分及各组分的含量如下：

（1）大量元素：硝酸钾1800mg/L、硝酸铵675mg/L、二水氯化钙350mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾150mg/L、七水硫酸亚铁27.5mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L；

（2）微量元素：四水硫酸锰21.5mg/L、七水硫酸锌8.3mg/L、硼酸6.0mg/L、二水钼酸钠0.2mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.02mg/L、六水氯化钴0.02mg/L；

（3）有机物：肌醇80.0mg/L、甘氨酸2.5mg/L、VB₂6.0mg/L、盐酸吡哆醇（VB₆）0.45mg/L、烟酸0.45mg/L、盐酸硫胺素（VB₁）0.1mg/L；

（4）植物生长调节剂：6-苄基腺嘌呤0.2-0.8mg/L、萘乙酸0.02-0.08mg/L；

余量为蒸馏水。

每升（L）生根培养基的组分及各组分的含量如下：

（1）大量元素：硝酸钾900mg/L、硝酸铵675mg/L、二水氯化钙175mg/L、七水硫酸镁160mg/L、磷酸二氢钾75mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L、七水硫酸亚铁27.5mg/L；

（2）微量元素：四水硫酸锰21.5mg/L、七水硫酸锌8.3mg/L、硼酸6mg/L、碘化钾0.83mg/L、二水钼酸钠0.2mg/L、五水硫酸铜0.02mg/L、六水氯化钴0.02mg/L；

（3）有机物：肌醇80.0mg/L、甘氨酸2.5mg/L、VB₂0.1mg/L、盐酸吡哆醇（VB₆）0.45mg/L、烟酸0.45mg/L；

（4）植物生长调节剂：萘乙酸0.05-0.15mg/L；

余量为蒸馏水。

本发明扁桃斑鸠菊的组织培养繁殖方法的继代、生根培养基的配制方法为：

1母液的配制与保存

1.1为便于取样，宜先配制各种母液，分为大量元素母液、微量元素母液、有机物母液和各种植物生长调节剂母液。蔗糖、琼脂不宜配成母液，需要时直接称样；

1.2大量元素母液浓度成100倍溶液，有机物、微量元素母液配成200倍溶液，植物生长调节试剂母液的浓度配成1mg/ml；

1.3母液选用无菌的蒸馏水、去离子水或超纯水配制，大量生产时用煮沸过的水；