[发明专利]一种检测乙酰甲胺磷的方法和试剂盒有效
申请号: | 201410072679.5 | 申请日: | 2014-02-28 |
公开(公告)号: | CN103837523A | 公开(公告)日: | 2014-06-04 |
发明(设计)人: | 吕斌;王雪娟;刘燕婕;石云 | 申请(专利权)人: | 华中科技大学 |
主分类号: | G01N21/76 | 分类号: | G01N21/76;G01N33/531 |
代理公司: | 华中科技大学专利中心 42201 | 代理人: | 夏惠忠 |
地址: | 430074 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 乙酰 甲胺磷 方法 试剂盒 | ||
1.一种采用多巴胺氧化聚合法在载体材料上合成可特异性结合乙酰甲胺磷的人工抗体(MIP)的方法,包括以下步骤:
步骤一:聚合反应:
(a)将模板分子乙酰甲胺磷与多巴胺按摩尔比为1:10-50的比例溶于PH=7.6的Tris-HCL缓冲溶液中,混匀的混合液;
(b)加入载体材料,
(c)聚合:室温下暴露于空气中48-72h进行聚合;
步骤二:洗脱模板分子:使用10%冰乙酸的水溶液和三蒸水反复震荡洗涤载体材料,再得到含MIP的载体材料。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的所述的载体材料是多孔酶标板、滤膜、纳米级微球或微米级微球。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述的滤膜如是硝酸纤维滤膜、醋酸纤维滤膜或滤纸。
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述的微球是四氧化三铁磁性微球或二氧化硅微球。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的载体材料是多孔酶标板,在步骤一之步骤(b)中,所述的加入载体材料的具体方法是:将混合液加入到多孔酶标板的孔中;在步骤二中,所述的使用10%冰乙酸的水溶液和三蒸水反复震荡洗涤载体材料的具体方法是:使用10%冰乙酸的水溶液反复震荡洗涤多孔酶标板7-14次,每次30-50min,再用三蒸水震荡洗涤7-14次,每次30-50min,即得到含MIP的酶标板。
6.按权利要求1所述方法制备的可特异性结合乙酰甲胺磷的人工抗体(MIP)。
7.一种检测乙酰甲胺磷的试剂盒,它有权利要求6所述的可特异性结合乙酰甲胺磷的人工抗体(MIP)。
8.一种检测乙酰甲胺磷的试剂盒,由含MIP的载体材料、乙酰甲胺磷标准溶液(0-200ng/mL)、胆碱酯酶AChE(500mU/mL)、乙酰胆碱ATCI (20μmol/mL)、胆碱氧化酶ChOX(1mg/mL)、辣根过氧化物酶HRP(15U/mL)、鲁米诺Luminol(1μmol/mL)组成,所述的含MIP的载体材料按权利要求1所述的方法制得。
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