[发明专利]一种乳粉中低聚果糖的高效液相色谱串联质谱检测方法

权利要求书

1.一种乳粉中低聚果糖的高效液相色谱串联质谱检测方法，其特征包括以下步骤：

（1）制备标准溶液并进行高效液相色谱串联质谱检测

称取各种低聚果糖标准品并将其配成混合标准储备液，再将混合标准储备液用蒸馏水逐级稀释，分别配成至少5种不同浓度的混合标准溶液，将不同浓度的混合标准溶液进行高效液相色谱串联质谱检测并得到标准谱图，标准谱图中保留时间确定低聚果糖品种，色谱峰面积与对应的低聚果糖浓度成函数关系；

（2）将步骤1获得的标准谱图按低聚果糖品种分别制作浓度与色谱峰面积关系曲线图；

（3）乳粉样品的预处理及高效液相色谱串联质谱检测

称取一定量的乳粉样品，依次加入蒸馏水和乙醇，涡旋振荡后，超声溶解，离心，取上清液稀释后过滤膜过滤，取滤液进行高效液相色谱串联质谱检测，得样品谱图；

（4）样品中的各低聚果糖的含量的确定

将步骤3中获得的样品谱图的保留时间确定低聚果糖品种并将其色谱峰面积与步骤2对应的低聚果糖品种的标准曲线进行比对，用插入法确定样品中的各低聚果糖的含量。

2.根据权利要求1 所述的乳粉中低聚果糖的检测方法，其特征在于：步骤1中不同浓度的混合标准溶液浓度从0.5 mg/L至20 mg/L分为6级，级间间隔由小至大大致倍增，每浓度级中各低聚果糖标准品含量相同。

3.根据权利要求1或2 所述的乳粉中低聚果糖的检测方法，其特征在于，在步骤1和2中高效液相色谱串联质谱的检测条件是：

色谱条件：

a)色谱柱：XBridge TM Amide，3.5μm，4.6×150mm；

b)进样量：5~20 μL；

c)柱温：30~50℃；

d)流速：0.3~0.6 mL/min；

e)流动相和洗脱时间：

流动相A：30/70乙腈/水溶液含0.10%氨水；

流动相B：80/20乙腈/水溶液含0.10%氨水；

洗脱时间0~30 min，流动相A从100%到60%，流动相B从0%到40%；

洗脱时间30~32 min，流动相A保持60%，流动相B保持40%；

洗脱时间32~34min，流动相A从60%到0%，流动相B从40%到100%；

洗脱时间34~35min，流动相A保持0%，流动相B保持100%；

质谱条件：

a)电离模式：负离子（ESI-）；

b)气帘气压力344.5 kPa，碰撞气压力中档，离子喷雾电压4500V，离子源温度550℃，雾化气压力344.5 kPa，辅助加热气压力344.5 kPa，接口加热器为开；

c)扫描模式：多反应检测（MRM）模式。