[发明专利]一种金属螯合肽的制备方法有效
| 申请号： | 201410078882.3 | 申请日： | 2014-03-06 |
| 公开（公告）号： | CN103880920A | 公开（公告）日： | 2014-06-25 |
| 发明（设计）人： | 汪少芸;黄顺丽;赵立娜;邵彪;方卫东;廖兰 | 申请（专利权）人： | 福州大学 |
| 主分类号： | C07K5/065 | 分类号： | C07K5/065;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/16;C12P21/06 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350108 福建省福州市*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 金属 螯合肽 制备 方法 | ||
1.一种金属螯合肽，其特征在于：所述肽的氨基酸序列为：fd。
2.根据权利要求1所述的一种金属螯合肽，其特征在于：所述的金属为Ca、Fe或Zn。
3.一种如权利要求1所述的一种金属螯合肽的制备方法，其特征在于：以乳清蛋白为原料，采用复合蛋白酶及风味蛋白酶复配对其进行酶解，分离纯化、冷冻干燥得到金属螯合肽。
4.根据权利要求3所述的一种金属螯合肽的制备方法，其特征在于：所述酶解条件为：底物浓度5%，酶解pH为7.0、温度49℃、酶解时间为7小时、酶-底物重量配比为1:25。
5.根据权利要求3所述的一种金属螯合肽的制备方法，其特征在于：所述酶为复合蛋白酶和风味蛋白酶，两种酶的重量复配比为复合蛋白酶：风味蛋白酶= 2:1。
6.根据权利要求3所述的一种金属螯合肽的制备方法，其特征在于：所述分离纯化的具体步骤为：酶解产物首先利用TOYOPEARL DEAE-650M阴离子交换色谱进行分离，洗脱液为浓度梯度为含有0-0.5 M NaCl的0.02 mol/L pH 9.0的磷酸缓冲液，流速为0.5 mL/min，洗脱峰在214 nm下进行测量；收集具有最高金属螯合活性的峰，再用Sephadex G-25凝胶过滤色谱进行分离，洗脱液为去离子水，流速为0.3 mL/min，洗脱峰在214 nm下进行测定；收集具有最高金属螯合活性的峰，利用半制备RP-HPLC-C18反相高效液相色谱再进行进一步分离，分离条件是用体积比0-30%乙腈溶液作为洗脱液梯度洗脱，流速为4 mL/min，收集具有最高金属螯合活性的洗脱峰，再利用分析型RP-HPLC-C18反相高效液相色谱再进行进一步分离，洗脱液为体积比0-10%乙腈溶液，流速为1 mL/min，收集洗脱峰，再采用LC/MS液质联用质谱仪分析得出洗脱峰处为所述金属螯合肽。
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