[发明专利]一种微藻金属螯合肽及其制备方法

权利要求书

1.一种金属螯合肽，其特征在于：所述肽的氨基酸序列为：vdearp。

2.根据权利要求1所述的一种金属螯合肽，其特征在于：所述的金属为Ca、Fe或Zn。

3.一种如权利要求1所述的一种金属螯合肽的制备方法，其特征在于：以微藻蛋白为原料，采用复合蛋白酶及风味蛋白酶复配对其进行酶解，分离纯化、冷冻干燥得到金属螯合肽。

4.根据权利要求3所述的一种金属螯合肽的制备方法，其特征在于：所述酶解的条件为：底物浓度5%，酶解pH为7.0、温度49℃、酶解时间为7小时、酶-底物重量配比为1:25；所述酶为复合蛋白酶和风味蛋白酶，两种酶的重量复配比为复合蛋白酶：风味蛋白酶= 2:1。

5.根据权利要求3所述的一种金属螯合肽的制备方法，其特征在于：所述分离纯化的具体步骤为：酶解产物首先利用TOYOPEARL DEAE-650M阴离子交换色谱进行分离，洗脱液为浓度梯度为含有0-0.5 M NaCl的0.02 M、pH 9.0的磷酸缓冲液，流速为0.5 mL/min，洗脱峰在214 nm下进行测量；收集具有最高金属螯合活性的峰，再用Sephadex G-25凝胶过滤色谱进行分离，洗脱液为去离子水，流速为0.3 mL/min，洗脱峰在214 nm下进行测定；收集具有最高金属螯合活性的峰，利用RP-HPLC-C18反相高效液相色谱再进行进一步的分离，反相HPLC的分离条件是用10-90%乙腈溶液作为梯度洗脱液，流速为1mL/min，洗脱液自含体积比为10%乙腈和90%水的混合液开始，至体积为90%乙腈和10%水的混合液结束，进行梯度洗脱，收集体积为8%乙腈和82%水处的洗脱峰，得到金属螯合肽。