[发明专利]一种双孢蘑菇菌株子实体颜色SCAR-PCR鉴定方法

权利要求书

1.一种双孢蘑菇菌株子实体颜色SCAR-PCR鉴定方法，其特征在于：利用SCAR分子标记对双孢蘑菇菌株进行PCR特异扩增，从而鉴定菌株的子实体颜色。

2.根据权利要求1所述的双孢蘑菇菌株子实体颜色SCAR-PCR鉴定方法，其特征在于：利用特异引物对双孢蘑菇菌株的基因组DNA进行SCAR-PCR扩增，所述特异引物的核苷酸序列为：

SCAR4-F：5’-CAAGTACTGAAAGTGTACTA-3’， 

SCAR4-R：5’-GAGCCTTTCCATGTGCTCAC-3’。

3.根据权利要求2所述的双孢蘑菇菌株子实体颜色SCAR-PCR鉴定方法，其特征在于：利用所述特异引物对双孢蘑菇菌株的基因组DNA进行SCAR-PCR扩增，特异性地扩增出1273bp的产物，其中菌株子实体颜色为棕色的扩增为阳性，菌株子实体颜色为白色的扩增为阴性。

4.根据权利要求2所述的双孢蘑菇菌株子实体颜色SCAR-PCR鉴定方法，其特征在于：所述SCAR-PCR扩增的条件为： 94℃预变性5min；94℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸1min，扩增35个循环；72℃延伸10min， 4℃保存。

5.根据权利要求2所述的双孢蘑菇菌株子实体颜色SCAR-PCR鉴定方法，其特征在于：所述SCAR-PCR扩增的反应体系为： 模板DNA 30ng，上游引物30ng，下游引物30ng，dNTPs 0.1 mmol/L，MgCl₂ 2.5 mmol/L，Taq DNA聚合酶 1 U，1×PCR缓冲液10μL，用ddH₂O将总体积补至20μL。