[发明专利]用于垃圾除臭的复合微生物制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种用于垃圾除臭的复合微生物制剂，其特征在于，该制剂为发酵型酸味，pH值为3.4~4.0，有效活菌总数≥1.0×10⁹ CFU/mL，其中，该有效活菌包括酿酒酵母菌10⁵~10⁷ CFU/mL、枯草芽孢杆菌10⁶~10⁸ CFU/mL、凝结芽孢杆菌10⁶~10⁸ CFU/mL、发酵乳杆菌10⁶~10⁸ CFU/mL、布氏乳杆菌10⁶~10⁸ CFU/mL、屎肠球菌10⁵~10⁷ CFU/mL和白色链霉菌10⁴~10⁶ CFU/mL。

2.一种如权利要求1所述的用于垃圾除臭的复合微生物制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）平板培养：采用划线接种法将酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、发酵乳杆菌、布氏乳杆菌、屎肠球菌和白色链霉菌的菌株分别接种于固体活化培养基平板上，于30℃~35℃培养36~48小时，使其复壮，形成单菌落；

步骤（1）中的固体活化培养基按照下述重量百分比配制：麦芽提取粉0.3%，牛肉膏0.3%，蛋白胨0.5%，酵母膏0.3%，KH₂PO₄ 0.05%，K₂HPO₄ 0.2%，蔗糖1%，MgSO₄·7H₂O 0.025%，琼脂1.8 %，其余为水，pH值为6.2~6.8，121℃灭菌20分钟，冷却备用；

（2）摇瓶种子制作：用接种环将步骤（1）活化的长势良好无污染的菌种分别接种到液体活化培养基中，以500mL三角瓶30℃~35℃、150~200 rpm条件下振荡培养36~48小时，得到摇瓶种子液；

步骤（2）中的液体活化培养基按照下述重量百分比配制：麦芽提取粉0.3%，牛肉膏0.3%，蛋白胨0.5%，酵母膏0.3%，KH₂PO₄ 0.05%，K₂HPO₄ 0.2%，蔗糖1%，MgSO₄·7H₂O 0.025%，其余为水，pH值为6.2~6.8，121℃灭菌20分钟，冷却备用；

（3）驯化培养：在5 L大三角瓶内加入液体驯化培养基，接入步骤（2）的单菌株进行驯化培养，接种量为2~5%，培养条件为30℃~35℃，150~200 rpm振荡培养，48~72小时；

步骤（3）中的液体驯化培养基按照下述重量百分比配制：麦芽提取粉0.3%，牛肉膏0.3%，蛋白胨0.5%，酵母膏0.3%，KH₂PO₄ 0.05%，K₂HPO₄ 0.2%，蔗糖1%，MgSO₄·7H₂O 0.025%，糖蜜2%，pH值为6.2~6.8，115℃灭菌15分钟，冷却备用；

（4）种子罐培养：在300 L带搅拌装置的不锈钢种子罐中加入培养基250 L，该培养基按照下述重量百分比配制：糖蜜10%，蛋白胨0.5%，其余为水，pH值顺其自然，75℃灭菌2小时，快速冷却至35℃后，取步骤（3）中驯化好的液体菌种进行混合接种，使步骤（3）驯化好的液体菌种重量之和与步骤（4）培养基的重量比例为1：10，其中各菌组分的重量占液体菌种重量之和的比例为：酿酒酵母菌5~10%、枯草芽孢杆菌15~25%、凝结芽孢杆菌15~20%、发酵乳杆菌10~15%、布氏乳杆菌10~15%、屎肠球菌15~25%和白色链霉菌10~20%，30～35℃发酵72~96小时，每天搅拌0.5~1小时，72小时开始检测pH值，待pH值降至3.4~4.0时即可，此时有效活菌总数≥2.0×10⁸ CFU/mL；

（5）发酵罐培养：在3吨带搅拌装置的不锈钢发酵罐内加入发酵培养基2.25吨，该培养基按照下述重量百分比配制：糖蜜10%，其余为水，pH值顺其自然，75℃灭菌2小时，快速冷却至35℃后，接入步骤（4）培养好的复合种子菌液，各菌组分的重量之和与步骤（5）中糖蜜的重量比例为1：1，30～35℃，72～96小时，每天搅拌0.5~1小时，72小时开始检测pH，待pH降至3.4～4.0时，即制成了用于垃圾除臭的复合微生物制剂。