[发明专利]一种应用南极假丝酵母脂肪酶B生产替卡格雷手性药物中间体的方法

权利要求书

1.一种将南极假丝酵母脂肪酶B（简称CALB）用于拆分具有（a）所示结构式的外消旋替卡格雷中间体，其中R=C_nH_2n+1CO或C_nH_2n-1CO(n=2～6)，R’=Cbz或Boc，获得单一构型中间体（b）； 

R=C_nH_2n+1CO或C_nH_2n-1CO(n=2～6)，R’=Cbz或Boc 

R’=Cbz或Boc。 

2.按照权利要求1的一种将CALB用于拆分具有（a）所示结构式的外消旋替卡格雷中间体获得单一构型中间体（b）的方法，其特征在于，包括以下步骤： 

（1）生物催化剂选择：选用南极假丝酵母脂肪酶B为生物催化剂； 

（2）将南极假丝酵母脂肪酶B溶于通用缓冲液中，再与消旋体底物（a）混合，得到混合液；将所述的混合液在一定温度下进行转化，得到反应液； 

（3）样品萃取：向反应液中加入有机溶剂，进行振荡混合后，离心分离，得化合物（b）。 

3.按照权利要求2的方法，其特征在于，所述的通用缓冲液为三羟甲基氨基甲烷（Tris）50mM；硼酸50mM；柠檬酸33mM；Na₃PO₄50mM，用HCl或NaOH调pH3～12。 

4.按照权利要求3的方法，其特征在于，所述的通用缓冲液pH为5。 

5.按照权利要求2的方法，其特征在于，步骤（2）所述的混合液中CALB酶浓度为0.04～1mg/ml。 

6.按照权利要求5的方法，其特征在于，混合液中CALB酶浓度为0.08mg/ml。 

7.按照权利要求2的方法，其特征在于，所述的混合液中消旋体底物浓度为1g/L～100g/L。 

8.按照权利要求7的方法，其特征在于，所述的混合液中消旋体底物浓度为20g/L。 

9.按照权利要求2的方法，其特征在于，所述的转化温度为20～70℃。 

10.按照权利要求2的方法，其特征在于，化合物（a）选自顺-1-丙酰氧基-N-苄氧羰基-4-氨基-2-环戊烯、顺-1-丁酰氧基-N-苄氧羰基-4氨基-2-环戊烯，对应所得的化合物（b）为（1S,4R）N-苄氧羰基-4-氨基-2-环戊烯-1-醇。