[发明专利]一种基于J亚群禽白血病病毒env基因保守序列的siRNA重组干扰载体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于J亚群禽白血病病毒env基因保守序列的siRNA重组干扰载体，其特征在于：该载体是利用所设计的siRNA，构建其发卡结构，退火后将形成的双链DNA连接到pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR干扰载体中获得的，其中siRNA其基因序列如序列表SEQ ID NO：1所示。

2.权利要求1所述的重组干扰载体的制备方法，其特征在于：具体步骤如下：

（1）基于env基因保守区域设计合成siRNA；其具体操作为：对ALV不同亚群及J亚群不同的毒株进行同源性分析，其同源性最高的env基因中较保守区域片段作为筛选siRNA的序列片段，利用siRNA在线设计软件，得到siRNA，碱基序列为GTACAGCGATGGAATTATT，其基因序列如序列表SEQ ID NO：1所示；

（2）设计合成含上述目的片段的发卡结构，其中top strand DNA，其基因序列如序列表SEQ ID NO：2所示，bottom strand DNA，其基因序列如序列表SEQ ID NO：3所示，将其退火形成双链后连接到pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR干扰载体中即得。

3.如权利要求1所述载体在干扰J亚群禽白血病病毒在体外细胞及活鸡体内转录与复制的应用。