[发明专利]一种能提高大黄素活性氧产生能力的化学修饰方法

权利要求书

1.一种通过提高大黄素的活性氧产生能力而提高其抗癌活性的化学修饰方法，包括以下步骤：

（1）大黄素与硫酸二甲酯在K₂CO₃存在下反应，生成1,3,8-三甲氧基-6-甲基-9,10-蒽醌，然后与N-溴代丁二酰亚胺发生自由基取代反应，生成1,3,8-三甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌，备用；

（2）1,3,8-三甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌与氢溴酸在不同温度下反应，分别生成1-羟基-3,8-二甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌和1,8-二羟基-3-甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌，备用；

（3）溴代正壬烷与甲胺水溶液进行亲核取代反应，生成甲基壬基仲胺，再与溴代辛烷、溴代壬烷或溴代癸烷继续进行亲核取代反应，生成甲基辛基壬胺、甲基双壬基叔胺或甲基壬基癸胺；溴代正壬烷与二甲胺水溶液反应也得到一个叔胺，为二甲基壬基叔胺；

（4）取1,3,8-三甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌、1-羟基-3,8-二甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌和1,8-二羟基-3-甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌与前述合成得到的四种叔胺反应，得到十二种大黄素长碳链季铵盐，其通式结构如式(I)所示。

2.如权利要求1所述的方法，具体步骤如下：

（1）1,3,8-三甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌的合成：取大黄素溶解于丙酮中，加入无水碳酸钾，在回流的状态下慢慢滴加(CH₃O)₂SO₂，大黄素：无水碳酸钾：(CH₃O)₂SO₂的物质的量比为1：10：10；回流24h，冷却至室温，浓缩，加入150ml水搅拌30min，抽滤，用丙酮洗涤，得到黄色粉末粗产品，硅胶柱层析用二氯甲烷洗脱分离得到1,3,8-三甲氧基-6-甲基-9,10-蒽醌；取1,3,8-三甲氧基-6-甲基-9,10-蒽醌：N-溴代丁二酰亚胺：过氧化苯甲酰质量比为1.2：2.2：0.2，和CCl₄加入三口烧瓶中，加热回流24h，冷却至室温，过滤，固体物分别用CCl₄，H₂O和丙酮洗涤后，再用硅胶柱层析二氯甲烷洗脱分离得到1,3,8-三甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌；

（2）1-羟基-3,8-二甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌的合成：三口烧瓶中加入1,3,8-三甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌、冰乙酸和氯仿，在氮气保护下按每0.85mmol滴加6mL 40%氢溴酸水溶液，滴加完毕后继续室温搅拌反应36h；结束反应后用氯仿萃取反应液，旋蒸除去氯仿后，残留物经柱层析用二氯甲烷洗脱分离得到橙色固体1-羟基-3,8-二甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌；

（3）1,8-二羟基-3-甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌的合成：三口瓶中加入1,3,8-三甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌、冰乙酸，在氮气保护下加热至110℃，缓慢滴加按每0.72mmol滴加5mL 40%氢溴酸水溶液；滴加完毕后，继续反应6h，析出大量橙色固体；结束反应，将反应物倒入冰水中，搅拌后抽滤，固体烘干，用硅胶柱层析三氯甲烷洗脱分离得到橙色固体1,8-二羟基-3-甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌；

（4）含壬基叔胺6a-6c的合成：40%(m/m)甲胺水溶液、溴代正壬烷和乙醇按50：15：15的体积比混合，与室温下搅拌反应5h，然后用蒸馏水洗涤反应混合液3次，除去未反应和过量的甲胺；水洗液用氯仿萃取，将洗涤后剩余的有机相与氯仿萃取液合并，用无水硫酸钠干燥，旋蒸除去氯仿后得淡黄色粘稠液体，即粗产品N甲基壬胺；经硅胶柱层析，洗脱剂二氯甲烷/乙醇=20:1，v/v分离得到无色粘稠液体N甲基壬胺；取N-甲基壬胺与溴代烷在NaOH存在下于乙醇中回流搅拌5h；所述溴代烷为溴代辛烷、溴代壬烷和溴代癸烷，N-甲基壬胺：溴代烷：NaOH的物质的量的比为1:1:1;用蒸馏水洗涤除去产物3次，水洗液用氯仿萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，旋蒸后得淡黄色液体，硅胶柱层析洗脱剂二氯甲烷分离得无色液体含壬基叔胺6a-6c；所述的含壬基叔胺6a-6c如式II所示； II；

（5）N，N-二甲基壬胺的合成：33%(m/m)二甲胺水溶液与溴代正壬烷以物质的量1:1的比例在乙醇中回流反应5h后；蒸馏水洗涤反应液3次以除去未反应和过量的二甲胺，水洗液用氯仿萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，旋蒸后得淡黄色液体，硅胶柱层析洗脱剂二氯甲烷分离得无色液体N，N-二甲基壬胺；

（6）长碳链大黄素季铵盐的合成：取单溴与含壬基叔胺6a-6c或N，N-二甲基壬胺以1：1的物质的量比在氯仿中回流反应24h；反应液旋蒸后经硅胶柱层析以二氯甲烷/乙醇从50:1到15:1梯度洗脱得到相应的亮黄色、橙黄色和紫红色固体；所述的单溴为1,3,8-三甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌；1-羟基-3,8-二甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌或1,8-二羟基-3-甲氧基-6-溴甲基-9,10-蒽醌。