[发明专利]核酸扩增反应用筒在审
申请号: | 201410089111.4 | 申请日: | 2014-03-12 |
公开(公告)号: | CN104046555A | 公开(公告)日: | 2014-09-17 |
发明(设计)人: | 齐藤祐司;高城富美男 | 申请(专利权)人: | 精工爱普生株式会社 |
主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 金世煜;苗堃 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 核酸 扩增 应用 | ||
技术领域
本发明涉及一种核酸扩增反应用筒。
背景技术
由Boom等人报告了使用二氧化硅粒子等核酸结合性固相载体和促溶剂从生物体材料更简便地提取核酸的方法(参照非专利文献1)。包括该Boom等人的方法在内并使用二氧化硅等核酸结合性固相载体和促溶剂使核酸吸附于载体并进行提取的方法主要由以下3个工序构成:(1)在促溶剂存在的条件下,使核酸吸附于核酸结合性固相载体的工序(吸附工序);(2)为了除去非特异性结合的夹杂物和促溶剂,用清洗液清洗吸附有核酸的载体的工序(清洗工序);以及(3)用水或低盐浓度缓冲液使核酸从载体溶出的工序(溶出工序)。
然而,最近,除以往的PCR装置以外,还开发了容易控制加热时间的热循环装置(参照专利文献1),但迄今为止尚未开发可适用于这些装置的筒等。
专利文献
专利文献1:日本特愿2010-268090
非专利文献
非专利文献1:J.Clin.Microbiol.,vol.28No.3,p.495-503(1990)
发明内容
本发明的目的在于提供一种能够简便地进行核酸扩增反应的核酸扩增反应用筒。
作为本发明的一个实施方式的核酸扩增反应用筒具备管、核酸扩增反应用容器和柱塞,上述管在其内部依次具备由第1油构成的第1塞子 (plug)、由与油混合时发生相分离且清洗结合有核酸的核酸结合性固相载体的第2清洗液构成的第2塞子、由第2油构成的第3塞子、由与油混合时发生相分离且将上述核酸从结合有核酸的核酸结合性固相载体溶出的溶出液构成的第4塞子、由第3油构成的第5塞子;上述核酸扩增反应用容器与上述管的第5塞子侧连通且含有油;上述柱塞被安装于上述管的第1塞子侧的开口部,将液体从管的第5塞子侧向上述核酸扩增反应用容器推出。在上述柱塞的内部可以收容油和与油混合时发生相分离且清洗结合有核酸的上述核酸结合性固相载体的第1清洗液。另外,进行逆转录反应的试剂可以被包含在上述溶出液中。进行上述逆转录反应的试剂可以含有逆转录酶、dNTP、引物。进行核酸扩增反应的试剂可以被包含在上述溶出液中。进行上述核酸扩增反应的试剂可以含有DNA聚合酶、dNTP、引物。上述核酸扩增反应用容器可以具有固定上述管的密封形成部和液滴移动的流路形成部。上述密封形成部可以具有收容从上述流路形成部溢出的油的油收容部。还可以具备与上述管的第1塞子侧连通并将上述核酸结合性固相载体导入上述管中的罐。上述罐与上述管可以介由上述柱塞结合。
本发明的另一个实施方式是一种核酸扩增反应用筒式试剂盒,具备上述任一种核酸扩增反应用筒和将上述核酸结合性固相载体导入上述管的罐。上述罐可以含有提取核酸的溶解液和上述核酸结合性固相载体。上述罐可以具有开口部,上述开口部可以具有可拆卸的盖。上述罐的开口部可以按照能够被安装于上述管的第1塞子侧的开口部的方式构成。
根据本发明,能够提供一种可简便地进行核酸扩增反应的核酸扩增反应用筒。
附图说明
图1:图1A和图1B是筒1的说明图。
图2:图2A~图2C是筒1的动作说明图。
图3:图3A~图3D是罐3的说明图。
图4:图4是固定爪25和导板26与安装部62的说明图。
图5:图5A和图5B是PCR容器30的周边的说明图。
图6:图6A是PCR装置100的内部结构的立体图。图6B是PCR装置100的主要结构的侧面图。
图7:图7是PCR装置100的框图。
图8:图8A是旋转体61的说明图。图8B是旋转体61的安装部62中安装有筒1的状态的说明图。
图9:图9A~图9D是安装筒1时的PCR装置100的状态的说明图。
图10:图10是使磁铁71向下方移动时的磁珠7的行为的示意图。
图11:图11A~图11C是核酸溶出处理的说明图。
图12:图12是使磁铁71摇动时的磁珠7的行为的示意图。
图13:图13是表示有无磁铁71摇动的表。
图14:图14A~图14C是液滴形成处理的说明图。
图15:图15A和图15B是热循环处理的说明图。
图16:图16是表示在本发明涉及的一个实施例中使用的核酸提取用试剂盒及其组装后的装置的图。
图17是表示本发明涉及的一个实施例中的实时PCR的结果的图。
具体实施方式
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