[发明专利]cDNA的合成方法

权利要求书

1.一种cDNA合成方法，其特征在于，包括以下工序：

吸附工序，在含有核糖核酸RNA的试样中混合含有离液物质的溶解液和核酸结合性固相载体，将RNA吸附于所述载体上，

逆转录工序，将吸附于所述载体的RNA在逆转录反应液中以吸附于所述载体的原样直接进行逆转录，合成cDNA，以及

溶出工序，将合成的所述cDNA溶出至溶出液中。

2.根据权利要求1所述的cDNA合成方法，其中，在逆转录工序之前，进一步包括将吸附有所述RNA的所述载体用清洗液清洗的工序。

3.根据权利要求1或2所述的cDNA合成方法，其中，在逆转录工序之后，进一步包括将吸附有所述RNA的所述载体用不含有机溶剂的清洗液清洗的工序。

4.根据权利要求1～3中的任一项所述的cDNA合成方法，其特征在于，所述逆转录反应液含有逆转录酶、dNTP、逆转录用引物。

5.根据权利要求1～4中的任一项所述的cDNA合成方法，其特征在于，所述溶出液含有DNA聚合酶、dNTP以及DNA扩增用引物。

6.根据权利要求1～5中的任一项所述的cDNA合成方法，其特征在于，所述逆转录反应液和/或溶出液含有BSA。

7.根据权利要求1～6中的任一项所述的cDNA合成方法，其特征在于，所述逆转录工序中，在小于50℃的条件下将所述RNA逆转录。

8.根据权利要求1～7中的任一项所述的cDNA合成方法，其特征在于，所述载体是磁性粒子。

9.一种cDNA合成试剂盒，其特征在于，含有：

含4～7M的胍盐、0～5%的非离子性表面活性剂和0～0.2M的还原剂的中性溶解液，

核酸结合性固相载体，

含4～7M的胍盐和0～5%的非离子性表面活性剂的第1清洗液，

由水或低盐浓度水溶液组成的第2清洗液，

含逆转录酶、dNTP以及逆转录用引物的逆转录反应液，以及

含DNA聚合酶、dNTP以及DNA扩增用引物的DNA扩增液。