[发明专利]葎草鲜嫩茎叶中同时分级提取葎草叶蛋白和总黄酮的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物有效成分提取工艺的方法，具体涉及一种葎草鲜嫩茎叶中同时分级提取葎草叶蛋白和总黄酮的方法。

背景技术

葎草[Humulus scandens(Lour.)Merr.]又名拉拉藤、拉拉秧、五爪龙、大叶五爪龙、割人藤等，为桑科葎草属草本植物，分布于我国除新疆、青海以外的所有省份，资源十分丰富。葎草营养成分较为全面，据分析，葎草鲜草粗脂肪、粗纤维的含量分别为0.6%、2.1%。葎草干物质中含有粗蛋白12.8%～20.46%，总黄酮含量约为2.03%，粗纤维15.4%～23.2%，无氮浸出物33.4%～41.8%，灰分7.1%～9.8%，钙0.84%～1.46%，磷0.26%～0.32%，以及Fe、Mn、Cu、Zn、VC、VE、叶绿素、胡萝卜素等多种微量元素及维生素。此外，葎草还含有木犀草素、葡萄糖甙、胆碱、挥发油、树脂等物质及葎草酮、蛇麻酮、牡荆素、B-葎草烯、石竹烯等多种化学活性物质。从而具有清热解毒、利尿消肿、消炎除湿、健胃化食等多种药理功效。因此，葎草具有很好的开发利用价值。

目前有关葎草叶蛋白提取的工艺只有王桃云等进行了研究（王桃云等，葎草叶蛋白提取工艺的优化，苏州科技学院学报--自然科学版，2005，22-1：59～64），但其提取工艺只试验了单因素对叶蛋白得率的影响，未能进行多因素综合试验，致使工艺的稳定性和重复性较差，另外葎草叶蛋白的得率也较低。

葎草黄酮的提取工艺研究有很多，但多是采用乙醇溶液提取。目前，提取葎草叶蛋白和黄酮的方法各自分开，都是以提取单项物质为目的，这样导致这些工艺存在重复处理、费时，无法对葎草资源进行深度利用，浪费葎草资源等问题。对于从葎草鲜嫩茎叶中同时分级提取叶蛋白和总黄酮的工艺尚无先例，而葎草茎叶中富含蛋白质（干物质百分含量达12.8%～20.46%）和总黄酮（干物质百分含量约为2.03%）。因此，研发出一种从葎草鲜嫩茎叶中同时分级提取叶蛋白和总黄酮的方法，对于提高葎草鲜嫩茎叶加工的效益，深度开发和利用葎草资源具有十分重要的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种葎草鲜嫩茎叶中同时分级提取葎草叶蛋白和总黄酮的方法，使得葎草中的叶蛋白和黄酮这两种重要的有效成分能同时得以开发利用，所得叶蛋白和总黄酮得率、纯度较高，叶蛋白提取率在85%以上、纯度在60%以上，总黄酮提取率在85%以上、纯度在60%以上，工艺条件准确可靠、适用于大规模生产。

葎草鲜嫩茎叶中同时分级提取葎草叶蛋白和总黄酮的方法，包括以下步骤：

步骤1，取葎草茎叶，洗净晾干后，测定含水量和湿重，然后将其切成片段；

步骤2，将步骤1所得葎草茎叶加入9～11倍重量的水中，匀浆4～6min，然后压滤得到葎草浆汁和滤饼；

步骤3，将步骤2所得葎草浆汁先在pH9～11、65～75℃条件下进行加热和碱性沉降，然后离心得上清液和沉淀，沉淀物经冷冻干燥即得葎草叶蛋白；

步骤4，将步骤2所得葎草浆汁和步骤3所得上清液混合，在pH9～11、70～90℃条件下提取30～90min，然后滴加酸液调节pH2～4，离心，所得沉淀经水洗、乙醇溶解、抽滤后，将滤液浓缩、冷冻干燥即得葎草叶总黄酮。

作为上述发明的进一步优选，所述步骤2中匀浆时间为5.5min。

作为上述发明的进一步优选，所述步骤3中碱性沉降pH为10，沉降温度为71℃。

作为上述发明的进一步优选，所述步骤4中提取条件为pH11、温度90℃，提取时间为30min，滴加酸液后混合液pH为3。

本发明与现有技术相比，其显著优点在于：第一，本发明在一次工艺工程中同时分级提取葎草叶蛋白和葎草总黄酮，使得葎草中的叶蛋白和黄酮这两种重要的有效成分能同时得以开发利用，提升了葎草资源的开发利用价值；第二，本发明克服了以往葎草总黄酮制备工艺中采用比色法定量导致测定总黄酮含量偏高且不能直接获取总黄酮的缺点，利用优化的碱提酸沉法获得较高纯度的葎草总黄酮；第三，所得叶蛋白和总黄酮得率、纯度较高，叶蛋白提取率在85%以上、纯度在60%以上，总黄酮提取率在85%以上、纯度在60%以上；第四，采用响应面和正交设计方法优化葎草叶蛋白和葎草总黄酮的提取工艺，确保了提取工艺条件准确可靠，具有安全、经济等特点，适用于大规模生产。

附图说明