[发明专利]一种水牛角提取液的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于中药有效成分提取方法技术领域，即水牛角提取液的制备方法。具体设计一种先进的动物角类药物的提取方法，利用冷冻粉碎及胶体磨进行超微粉碎，提高了提取面积，增加了提取收率，充分的利用药材资源，同时模拟药物进入胃肠后的消化吸收环境而进行的水解，并通过膜分离技术进行纯化的，进行难以通过水煎方式进行提取的角类药材新的提取方法。

背景技术

水牛角为牛科动物水牛Bubalus bubalis Linnaeus的角，收载于《中国药典》2010版一部77页，具有清热凉血、解毒定惊的功效，主要用于温病高热，神昏谵语，发斑发疹，吐血、惊风、癫狂等证。为中药犀角的替代品，是常用中药，镑片或搓成粗粉15-30g，先煎3小时以上使用。现代化学成分研究表明，水牛角含多种氨基酸、肤类、蛋白质、角纤维、当醇类、肌类、强心苷类等化学成分。药理作用研究结果证明水牛角水煎液有抗感染、缩短凝血时间以及镇静等作用，但由于角类药材质地坚实，提取比较困难，所以传统角类药物均挫末用药汁兑服，但由于水牛角作为犀角的替代品用量很大，所以人们经常采用水提、酸水解、碱水解、酸碱水解、酶解等方式进行提取，由于水牛角质地致密，提取率非常低，同时，由于不同的酶，酶切位点各异，酶的选择影响了水解解物中肽段的分子量大小及氨基酸组成, 从而导致的酶解产物生物活性的差异. 总提取的成分与机体内自然吸收的成分存在差异性，有的工艺还有钡残留。

冷冻粉碎技术利用了物料在低温状态下的“低温脆性”,即物料随着温度的降低,其硬度和脆性增加,而塑性及韧性降低,在一定温度下,用一个很小的力就能将其粉碎。冷冻粉碎技术可获得更细的粉末,使物料的流动性得到较大改善,等条件时冷冻粉碎的处理能力显著高于常温粉碎并可以保持药材的有效成分。

胶体磨匀浆技术，是一种比较新的湿法粉碎技术，通过胶体磨匀浆，可以把难粉碎的药材进行粉碎，提高了不易被溶剂穿透而进行提取的药材的提取面积。 

膜分离技术因操作条件温和,能耗又低, 被认为是分离小肽及氨基酸体系的理想方法。以往方法,提取效果差，收率低。

发明内容

为了改进水牛角的提取方法，更好的提高水牛角药材的利用率，更好的利用水牛角药材，得到纯度较高、更接近机体的吸收的提取液成分，提供了水牛角的提取方法。

    采用冷冻粉碎和胶体磨湿法粉碎相结合，配合仿胃肠道环境的仿生态提取技术，结合先进的膜分离技术，提取水牛角中的活性成分，是一个低风险、高产出的项目，具有很高经济效益和社会效益的方式。可以改善节约药材资源，更好的提取和保证水牛角有效成分，增加含水牛角产品的价值和市场竞争力，为中药角类药物的新产品开发开辟了新的道路。

本发明的目的是提供一种水牛角提取液的制备方法，其是将水牛角表面刷洗干净后抛片、冷冻粉碎，然后投入胶体磨进行湿法粉碎，研磨液加入人工胃液提取（酸及胃蛋白酶水解）和人工肠液提取（胰蛋白酶、糜蛋白酶水解），每步后均加热进行酶灭活，合并提取液，调PH值，微孔滤膜过滤、超滤（切割相对分子量分子量20000）除去加入蛋白酶及大分子杂质的，收集后浓缩成水牛角提取液或喷雾干燥得水牛角提取物。

一种水牛角提取液的制备方法，其特征在于步骤如下：

1.将水牛角刷净表面，电刨薄片后放入液氮中冷冻后进行粉碎。

2.将冷冻粉碎得水牛角粉，按料液比1:1-1:10投入胶体磨进行湿法粉碎，得研磨液。

3.将上述研磨液，加热至沸腾，沸腾后微沸状态继续提取2-6h。然后分离提取液，水牛角继续加水（料液比1:1-1:10）重复上述步骤提取2-4次，过滤后合并提取液浓缩后备用；水牛角药渣备用。

4.将步骤3水提后的水牛角药渣，加入人工胃液进行水解（料液比1:1-1:10），温度39℃，水解4-6小时，加热至85℃灭活蛋白酶，过滤后上清液浓缩备用，水牛角药渣备用；所述人工胃液按《中国药典》附录配制：稀盐酸16.4ml，加水800ml与胃蛋白酶10g，摇匀后，加水衡释至100ml，用量同比例放大；采用人工胃液进行水解，与水牛角粉末服用后进入机体在胃中的pH值、酶的种类和浓度等消化条件一致，通过这种仿生方法，在体外得到与体内一致的水解物，避免以往酸碱酶水解法导致的过度水解或水解不到位，避免由于不同的酶，酶切位点各异，酶的选择影响了水解解物中肽段的分子量大小及氨基酸组成, 从而导致的酶解产物生物活性的差异。