[发明专利]包含突变INDEHISCENT等位基因的芸苔属植物有效
申请号: | 201410092859.X | 申请日: | 2008-11-25 |
公开(公告)号: | CN103898125B | 公开(公告)日: | 2018-03-13 |
发明(设计)人: | B·拉加;B·登博尔;B·朗伯特 | 申请(专利权)人: | 拜尔作物科学公司 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N5/10;C07K14/415;C12Q1/6895;A01H5/10 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所11247 | 代理人: | 史文静,黄革生 |
地址: | 比利时*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 包含 突变 indehiscent 等位基因 芸苔属 植物 | ||
1.产生在两个基因座包含至少两个IND基因的芸苔属种子或植物的方法,所述芸苔属种子或植物的特征在于,其包含两种突变IND等位基因,其中所述突变IND等位基因是IND-C1基因的突变等位基因,其中:
(a)所述IND-C1基因的编码序列由SEQ ID NO:3的序列组成;
(b)所述IND-C1基因的基因组DNA由SEQ ID NO:7的序列组成;和
(c)所述IND-C1基因编码下述蛋白质,所述蛋白质的氨基酸序列由SEQ ID NO:4的序列组成;
其中所述突变等位基因编码非功能性IND蛋白质,并且其中所述突变等位基因包含导致缺乏HLH结构域的截短蛋白质的无义突变,
所述方法包括将纯合状态的包含所述两种突变IND等位基因中的一种突变IND等位基因的第一芸苔属植物与纯合状态的包含所述两种突变IND等位基因中的一种突变IND等位基因的第二芸苔属植物杂交,从所述杂交收集种子,和任选地从所述种子生长出植物。
2.权利要求1的方法,其中所述突变等位基因编码下述蛋白质,所述蛋白质的对应于SEQ ID NO:4的第50位的氨基酸密码子被取代为终止密码子,或其中所述突变等位基因编码下述蛋白质,所述蛋白质的对应于SEQ ID NO:4的第135位的氨基酸密码子被取代为终止密码子。
3.权利要求1的方法,其中所述第一或所述第二芸苔属植物是从保藏在ATCC的登录号为PTA-8796的种子或从保藏在ATCC的登录号为PTA-8795的种子可获得的。
4.鉴别权利要求1或2中所述的包含两种突变IND等位基因的芸苔属植物或植物细胞的方法,所述方法包括在生物样品中鉴别权利要求1或2中所描述的所述两种突变IND等位基因,包括针对每种突变IND等位基因确定生物样品中存在的核酸中的突变IND等位基因的突变的DNA区域的存在,包括使用包含引物的组的试剂盒,对所述生物样品进行聚合酶链式反应,所述引物的组选自:
(a).两条引物的组,其中,所述引物之一特异性识别所述突变IND等位基因的突变的DNA区域的5’或3’侧翼的DNA区域,且所述引物之另一特异性识别所述突变IND等位基因的突变的DNA区域,
(b).两条引物的组,其中,分别地,所述引物之一特异性识别所述突变IND等位基因的突变的DNA区域的5’或3’侧翼的DNA区域,且所述引物之另一特异性识别所述突变IND等位基因的突变DNA区域和3’或5’侧翼区域之间的连接区域。
5.鉴别权利要求1或2中所述的包含两种突变IND等位基因的芸苔属植物或植物细胞的方法,所述方法包括在生物样品中鉴别如权利要求1或2中所描述的所述两种突变IND等位基因,包括针对每种突变IND等位基因确定生物样品中存在的核酸中的突变IND等位基因的突变的DNA区域的存在,包括使生物样品与经标记的寡核苷酸以及第二核酸寡核苷酸杂交,所述经标记的寡核苷酸包含突变序列的核苷酸序列或跨越在5’侧翼区域与突变区域之间的连接区域的序列,所述第二核酸寡核苷酸包含突变序列恰好下游并与其邻接的3’侧翼序列,其中第一和第二寡核苷酸通过至少一个核苷酸重叠。
6.在生物样品中鉴定权利要求1或2中所述的包含两种突变IND等位基因的芸苔属植物或植物细胞中的两种突变IND等位基因的试剂盒,所述试剂盒包含每种突变IND等位基因的引物的组,所述组选自:
-两条引物的组,其中,所述引物之一特异性识别所述突变IND等位基因的突变的DNA区域的5’或3’侧翼的DNA区域,且所述引物之另一特异性识别所述突变IND等位基因的突变的DNA区域,和
-两条引物的组,其中,分别地,所述引物之一特异性识别所述突变IND等位基因的突变的DNA区域的5’或3’侧翼的DNA区域,且所述引物之另一特异性识别所述突变IND等位基因的突变DNA区域和3’或5’侧翼区域之间的连接区域。
7.在生物样品中鉴定权利要求1或2中所述的包含两种突变IND等位基因的芸苔属植物或植物细胞中的两种突变IND等位基因的试剂盒,所述试剂盒包含针对每种突变IND等位基因的经标记的寡核苷酸以及第二核酸寡核苷酸,所述经标记的寡核苷酸包含突变序列的核苷酸序列或跨越在5’侧翼区域与突变区域之间的连接区域的序列,所述第二核酸寡核苷酸包含突变序列恰好下游并与其邻接的3’侧翼序列,其中第一和第二寡核苷酸通过至少一个核苷酸重叠。
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