[发明专利]萱藻全人工育苗技术

说明书

技术领域

    本发明涉及一种海藻养殖技术，特别涉及一种萱藻全人工育苗技术。

背景技术

萱藻（Scytosiphon lomentaria）隶属褐藻门（Phaeophyta），系泛温性海藻，在我国广泛分布于北起辽东半岛南至广东省海陵岛之间的沿海地区。萱藻具有异形世代交替的生活史，宏观的管状藻体为配子体阶段，微观的丝状体、垫状体和类垫状体为孢子体阶段。丝状体、垫状体和类垫状体在一定条件下可以相互转化，影响转化的关键因素是温度，高温条件可以促使丝状体形成类垫状体、垫状体，而低温条件则使类垫状体和垫状体形成丝状体。萱藻丝状体具有易保存、生长快速的特性，是萱藻保种、扩增、采苗的材料。

萱藻富含褐藻酸、蛋白质、不溶性膳食纤维、EPA，还具有岩藻甾醇、豆蔻酸等营养成分，各种氨基酸组成比例平衡、口感鲜美，备受沿海地区居民的推崇。据报道，从萱藻中提取的活性成分对Ehrlich瘤细胞抑制率达到69.8%，在46种常见海藻的提取物中居于首位，并且萱藻中的活性成分还可对HL-60肿瘤细胞的生长起抑制作用，上述研究均说明萱藻在抗肿瘤应用方面极具开发价值。同时，作为一种大型海藻，萱藻在改善水体富营养化、养殖海区生态修复等方面也具有广阔的应用前景。在市场供不应求而野生资源又严重匮乏的情况下，开展萱藻规模化育苗与人工养殖已势在必行。

实现萱藻全人工育苗的关键环节在于采苗。据报道，曾有学者以萱藻丝状体切碎的方式进行采苗，但经本实验室研究人员反复的实验证实此法并不适用于萱藻的大规模人工育苗。目前关于丝状体能否直接生出幼叶状体、以何种机制生出幼叶状体的问题国内外专家尚未达成共识，以丝状体作为萱藻幼苗的“种子”在数量及密度上难以达到由单室孢子囊放散的孢子量的数量级。而且，切碎的丝状体只能“粘附”于附着基上，这种“粘附”是不牢靠的，难以经受风浪的冲击。

发明内容

针对现有技术的缺陷和弊端，本发明的目的是提供一种采用孢子采苗的萱藻全人工育苗技术，不仅可以提高种质利用率，还可以解决幼苗附着差、密度低等问题。

为了实现上述目的，本发明的技术方案包括以下步骤：

（1）种质制备：由当年采集的萱藻制备而成，或由往年保存的种质复苏获得；

（2）种质扩增：将种质接种于气升式光生物反应器中进行扩增；

（3）种质诱导：将扩增后的萱藻种质在诱导条件下进行培养，形成成熟的单室孢子囊；

（4）孢子采苗：将诱导后的单室孢子囊进行阴干刺激使孢子放散，再以网帘采集孢子；采用流水刺激法冲洗阴干后的种质促使孢子放散，当水体中孢子密度达到15-25×10⁴ind./mL后，以网帘采集孢子；将网帘投入孢子水中，使孢子附着在网帘上，附着时间为12-48小时，附着密度为10×40倍镜下，附着有孢子的载玻片上单个视野孢子数为5-15个；

（5）幼苗室内培育：孢子经自然萌发后形成幼苗，幼苗在室内培育7-14天，控制培育条件使幼苗平均体长达300-800μm；

（6）海上养殖：培育的幼苗采用筏式平挂养殖，投挂深度40-120厘米；海上养殖天数为60-80天。

在上述步骤中，所述步骤（1）中当年种质制备方法为：选择成熟萱藻种菜，其特征为藻体深褐色、表面具有配子囊斑、中空缢节；使用消毒海水冲洗管状藻体的内外表面，将洗净的萱藻种菜于6-12℃的培养箱中阴干1-3小时后，投入4-8℃的消毒海水中放散雌、雄配子，4-24小时后雌雄配子结合成合子，将其取出在温度8-16℃，光照时长12小时，光照强度18.0-54.0μmol/（m²·s）的条件下培养40天，每3-5天全量更换培养水体，获得萱藻丝状体，即种质。

所述往年保存的种质源自萱藻种质库，由连续多年采集不同地域的萱藻种质建立而成，其种质制备方法与当年种质制备方法相同。 

所述步骤（2）中种质扩增的条件为：种质接种密度为0.1-0.5mg/mL，温度18-22℃，光照时长12-16小时，光照强度43.2-108.0μmol/（m²·s）；控制培养水体中的营养盐NO₃-N为40-80mg/mL，PO₄³-P为1-4 mg/mL，每5-7天全量更换培养水体。