[发明专利]海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌及其分离纯化和应用

权利要求书

1.一种海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌，其特征在于：该菌为HS-10菌株，分类命名为假交替单胞菌（Pseudoalteromonas sp.），于2012年4月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No. 6044，该菌株的16S rDNA的Genbank登陆号为JX087926。

2.根据权利要求1所述的海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌，其特征在于该菌株的生物学特征如下：革兰氏染色阴性，为杆菌，精氨酸双水解试验、赖氨酸脱羧酶试验、柠檬酸盐试验、鸟氨酸脱羧试验、尿素酶试验阳性，V-P反应、H₂S反应、明胶液化实验阴性，可以利用蔗糖。

3.根据权利要求1所述的海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌，其特征在于：该菌株海水中生长，最适生长温度25-30 ℃，最适生长pH 为7.0-7.8，在固体培养基上，菌落圆形、凸起，边缘完整，呈灰白色，半透明。

4.一种根据权利要求1所述的海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌的分离纯化方法，其特征在于具体包括如下步骤：

（1）培养基配制

将氯氰菊酯和溴氰菊酯混合溶液加入到营养培养基中，使氯氰菊酯和溴氰菊酯终浓度均为100mg/L，得到富集培养液；

（2）降解菌分离纯化

取500mL海水样品无菌状态下过滤富集后，加入到含富集培养液的三角瓶中，于28℃、转速180 rpm的条件下，培养7d后，按10%体积接种量转移到新配制的富集培养液中，再在温度28 ℃、转速180 rpm的条件下，培养7d，重复上述步骤连续富集培养3次，取培养基发酵液进行平板划线分离、纯化，直到筛选得到单个菌落，将纯化后的各菌落分别接至富集培养液中振荡培养，在温度28℃、转速180 rpm的条件下，培养7 d，通过气相色谱-电子捕获器检测各富集培养液中拟除虫菊酯类农药残留量，最后筛选获得一株对氯氰菊酯和/或溴氰菊酯农药具有高效降解能力的菌株，即氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌HS-10菌株。

5.一种根据权利要求4所述的海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌的分离纯化方法，其特征在于所述的营养培养基配制方法如下：精确称取磷酸高铁0.01g、蛋白胨5.0g、酵母膏1.0g，加入过滤海水1000mL，混合均匀后，调节pH 为7.0-7.8，于121℃高压蒸汽灭菌20min后制得。

6.一种根据权利要求1海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌的应用，其特征在于：该菌株对氯氰菊酯和/或溴氰菊酯具有较高的生物降解能力，可用于氯氰菊酯和/或溴氰菊酯农药污染的海水及沉积物环境的生物修复。

7.根据权利要求6所述的海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌的应用，其特征在于：该菌株在温度25-30℃、pH 7.0-7.8、氯氰菊酯和溴氰菊酯农药浓度均为100mg/L 的条件下，7d 后对海水中氯氰菊酯和溴氰菊酯的降解率分别达到75.6%和90.9% 以上。

8.根据权利要求6所述的海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌的应用，其特征在于：该菌株在温度25-30℃、pH 7.0-7.8、氯氰菊酯农药浓度为100mg/L 的条件下，7d 后对海水中氯氰菊酯的降解率达到75.6% 以上。

9.根据权利要求6所述的海水环境中氯氰菊酯和/或溴氰菊酯降解菌的应用，其特征在于：该菌株在温度25-30℃、pH 7.0-7.8、溴氰菊酯农药浓度为100mg/L 的条件下，7d 后对海水中溴氰菊酯的降解率达到90.9% 以上。