[发明专利]一种免疫磁珠及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种免疫磁珠，包括磁性粒子内核和包被在所述磁性粒子内核外表面的羧基糖类，其中所述磁性粒子包括超顺磁性四氧化三铁。

2.根据权利要求1所述的免疫磁珠，其特征在于，所述糖类选自葡萄糖、果糖、葡聚糖、蔗糖和麦芽糖中的1种或至少2种的组合，优选葡萄糖、果糖和葡聚糖中的1种或至少2种的组合。

3.根据权利要求1或2所述的免疫磁珠，其特征在于，所述免疫磁珠的粒径介于20nm-3μm范围内，优选100nm-1μm范围内。

4.一种制备权利要求1-3任一项所述的免疫磁珠的方法，包括如下步骤：

（1）磁珠的制备：使三价铁源、二价铁源和糖类在碱性溶液作用下共沉淀生成包含顺磁性四氧化三铁的磁性粒子，所述磁性粒子表面包被有糖类分子；

（2）磁珠的羧基化：用多元酸酐与磁性粒子表面的糖类分子反应生成羧基糖类包被的免疫磁珠。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述三价铁源与糖类的质量比为0.1:1～6:1，优选为1:1～4:1。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，所述磁珠的制备在温度为60～95℃下进行，优选为80～90℃下进行；

优选地，所述共沉淀的反应时间为15分钟～1小时，优选为30分钟～45分钟；

优选地，所述共沉淀反应在惰性气体保护下进行。

7.根据权利要求4-6任一项所述的方法，其特征在于，所述三价铁源选自氯化铁、硝酸铁和硫酸铁中的1种或至少2种的组合；

优选地，所述二价铁源选自氯化亚铁、硝酸亚铁和硫酸亚铁中的1种或至少2种的组合；

优选地，所述糖类选自葡萄糖、果糖、葡聚糖、蔗糖和麦芽糖中的1种或至少2种的组合，优选葡萄糖、果糖和葡聚糖中的1种或至少2种的组合；

优选地，所述碱性溶液选自氨水、氢氧化钠和氢氧化钾溶液中的1种或至少2种的组合；

优选地，所述氨水占反应液总重量的25-75%；

优选地，所述氢氧化钠和/或氢氧化钾占反应液总重量的0.5-5%；

优选地，所述步骤（1）生成的磁性粒子的粒径介于20nm-3μm范围内，优选100nm-1μm范围内。

8.根据权利要求4-7任一项所述的方法，其特征在于，所述多元酸酐选自戊二酸酐、马来酸酐和丁二酸酐中的1种或至少2种的组合，优选丁二酸酐；

优选地，所述多元酸酐的用量按质量计为所述磁性粒子用量的1～5倍。

9.根据权利要求4-8任一项所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

（1）在惰性气体保护下，将以铁计浓度为1～10mg/mL的三价铁源和二价铁源的混合溶液与以糖分子计浓度为2～40mg/mL的糖类溶液混合，并升温到60～95℃；

（2）加入碱性溶液，在惰性气体保护下反应15分钟～1小时，生成包含顺磁性四氧化三铁的磁性粒子；

（3）将所述磁性粒子磁分离并清洗后，分散于水中制成分散液；

（4）向所述分散液中加入相当于所述磁性粒子质量1～5倍的多元酸酐，反应3～24小时得到羧基糖类包被的免疫磁珠。

10.根据权利要求1-3任一项所述的免疫磁珠在食源性致病菌检测中的应用；

优选地，所述应用为将检测用抗体和/或多肽分子固定在所述免疫磁珠表面用于食源性致病菌检测；

优选地，所述食源性致病菌包括沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、李斯特菌、志贺氏菌和大肠杆菌O157。