[发明专利]一种从珍珠蛋白中酶解分离珍珠活性多肽的方法

说明书

技术领域

本发明涉及珍珠深加工方法，尤其涉及一种从珍珠蛋白中酶解分离珍珠活性多肽的方法。

发明内容

目前，珍珠粉的应用过程中，曾相继遇到颗粒大小安全隐患、流动性差、不溶水以及功效成分难以释放等诸多问题，这些直接影响珍珠粉的应用领域。为能解决以上问题，业内已经向水溶性珍珠粉以及珍珠水解液发展。

中国发明专利（申请号：01139157.X 申请日：2001-12-19）公开了一种珍珠粉的生物酶解制备方法,其关键是以乳酸水溶液为溶剂,将珍珠溶解,并调整溶液的pH值至近中性再用酸回调至偏酸性,再放入适量生物活性酶催化分解其蛋白质,得到酶解珍珠胶液,再采用喷雾干燥将酶解珍珠胶液快速干燥,固化造粒,制得超细酶解珍珠粉。所制备的珍珠粉保留了珍珠中的多种氨基酸、微量元素等有效成份,并使珍珠中的碳酸钙转化为人体易吸收的活性钙,胃酸不溶解的角质蛋白酶解成易吸收的游离氨基酸。

中国发明专利（申请号：200710141569.X 申请日：2007-08-07）公开了一种制备珍珠活性肽的方法,它从新活的珍珠贝里取出珍珠粒,水洗干净,将珍珠粒与去离子水混合后,用磷酸盐缓冲溶液将混合液的PH值调至中性偏酸,然后用沙雷肽酶与珍珠粒进行酶水解反应；用滤网过滤分离得珍珠粒和澄清液,然后将反应液水煮灭酶；再将所得的溶液经喷雾干燥即得珍珠活性肽。

中国发明专利（申请号：200910114409.5 申请日：2009-09-18）公开了珍珠水解液的制备方法，其步骤如下：1)取珍珠粉置于盐酸水溶液中，搅拌，直至反应完全，用氨水调节该混合液的pH值至中性，离心，得沉淀A；2)沉淀A用纯净水溶解，再以氨水调节其pH值为7.5～8.5，离心，得沉淀B；3)沉淀B用纯净水溶解，加入酶进行酶解，酶解液离心，得上清液和沉淀C；所述的酶为蜗牛蛋白酶和木瓜蛋白酶的混合物，加入量为沉淀B重量的0.3～1.05％；4)将沉淀C用纯净水溶解加酶进行二次酶解，离心，收集上清液；酶为胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的混合物，加入量为沉淀B重量的0.2～0.45％；5)合并两次上清液，煮沸，用孔径为1～3nm的纳滤膜过滤，即得。

发明内容

为了解决上述的技术问题，本发明的目的是提供一种从珍珠蛋白中酶解分离珍珠活性多肽的方法，本该方法利用机械化学原理，快速无破损地分离珍珠功效成分，获得珍珠活性多肽，为珍珠护肤品和保健品提供原料。

为了实现上述的目的，本发明采用了以下的技术方案：

一种从珍珠蛋白中酶解分离珍珠活性多肽的方法，该方法包括以下的步骤：

1）在将珍珠蛋白溶液中加入5～20倍pH值6.5～7.5的磷酸盐缓冲液，匀质；

2）将匀质后混合液的进入100～120℃，0.15～0.2MPa环境下预处理20～60分钟处理；

3）将混合液置于反应锅中，加入体系质量0.5%～2%的中性蛋白酶，在40～70℃温度中进行酶催化反应4～8小时，反应结束后在沸水浴灭酶5～15min，离心，去上清液，即为珍珠活性多肽。

作为优选，所述的珍珠活性多肽灭菌处理，无菌灌装，压盖制成珍珠活性多肽。

本发明由于采用了上述的技术方案，将珍珠粉中功效成分进行分离，并将机械化学原理应用于制备方法中。机械方法能在不破坏珍珠粉成分活性的基础下，进行珍珠粉重要成分的分离提取，珍珠粉中蛋白的获得，并纯化后酶解，能够更为有效发挥珍珠粉美白的作用。此方法的应用，极大的扩大珍珠粉的应用领域，并精细化珍珠粉的深加工应用。

附图说明

图1为实施例1的经压力温度处理过后的珍珠蛋白相比未处理过的珍珠蛋白酶解效果存在明显的提升作用。

图2为实施例1制得的珍珠活性多肽成分分析图。

图3实施例1制得的珍珠复合美白因子对酪氨酸酶活性的影响图。

图4 为实施例1制得的珍珠活性多肽对细胞生长的影响图。

图5为实施例1制得的珍珠复合美白因子对细胞内黑色素含量的影响图。

图6为显微镜观察珍珠复合美白因子对细胞的影响，a c分别表示添加珍珠复合美白因子24h和48h的细胞生长情况，b d分别表示未添加珍珠复合美白因子24h和48h的细胞生长情况。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明做进一步详细说明，但本发明不仅限于以下实施例。

实施例1