[发明专利]一种高效的大豆细胞质雄性不育的测交方法及装置

说明书

技术领域：

发明提供一种高效的大豆细胞质雄性不育的测交方法及装置，涉及大豆细胞质雄性不育保持系的测定、恢复系及恢复能力的测定，利用这种方法选育不育系及恢复系，属于作物杂交种选育技术领域。

背景技术：

“三系”杂交种是由不育系与恢复系杂交获得的F₁种子。“三系”包含不育系、保持系和恢复系，不育系本身雄性不育雌性可育，只能接受外来的花粉才能结实；保持系具有保持不育系不育的特性，给不育系授粉，可以继续获得不育系；恢复系具有使不育系恢复正常可育的特性，给不育系授粉后所结种子在下一代种植时育性恢复正常，即为杂交种。在杂交种的选育中，不育系和恢复系是基础材料。因此任一种质资源首先需要确定其恢保关系，如果是保持系经过多代回交可转育为不育系，如果是恢复系，根据其恢复程度、配合力等特性可在育种中直接利用或作为育种中间材料间接利用。目前常用的测交方法主要是利用单一不育系作为测交母本，待测材料作为父本人工授粉杂交得到F₁杂交荚，并在下一种植季种植F₁种子，鉴定F₁植株的花粉败育率确定其恢保关系。

常规的测交方法的存在以下缺点：一是人工杂交成活率不高、效率低，不适合大规模测交，特别是育种中对大量改良后代群体测交可操作性差；二是有相当多的不育系，可被某些不育系恢复，但不能被另一些恢复系恢复，即使可被某些不育系恢复，但反映不出恢复系的恢复能力。利用单一母本测交，容易漏掉只能恢复某些特定类型不育系的恢复系，同时无法确定其准确的恢复能力和程度。因此，常规测交方法不能完全满足大批量种质测交需要。

发明内容：

本发明提供一种高效的大豆细胞质雄性不育的测交方法，解决现有测交方法的诸多缺点，具有省时、省工、方法简单、操作方便、结果可靠、效率高等优点。

本发明还提供了适用于上述方法的装置。

本发明提供的一种高效的大豆细胞质雄性不育的测交方法，其特征在于：

同时利用一组典型的、不同类型的不育系为测交母本，在隔离条件下，采用一父多母的配置方法，利用昆虫传粉，一次测交可测出待测材料是保持系还是恢复系以及不同的恢复类型。

本发明公开的一种高效的大豆细胞质雄性不育的测交方法，包括以下步骤：

1）选择测交母本不育系：

第一测交母本，可被所有保持系保持，同时该类不育系可被所有恢复系恢复，F₁花粉败育率在0-10%之间，属于极易被恢复类型，以JLCMS82A和JLCMS101A为代表，还包括在被恢复程度上与其类似的其他不育系； 

第二测交母本，可被所有保持系保持，同时可被超过50%的恢复系恢复，F₁花粉败育率在11-60%之间，属于易被恢复类型，以JLCMS9A为代表，还包括在被恢复程度上与其类似的其他不育系。这类不育系可被超过50%的恢复系恢复；

第三测交母本，可被所有保持系保持，同时仅能被小于10%的恢复系恢复，F₁花粉败育率大于61%，属于难被恢复类型，以JLCMS89A和JLCMS31A为代表，还包括在被恢复程度上与其类似的其他不育系；

2）测交用网室：

测交用网室是由钢筋方框骨架及覆盖其上的纱网罩构成封闭空间，测交用网室的侧面纱网罩设有拉链开口；

3）田间播种方式：

播种季节，在大田按小区播种，步骤1）的三种测交母本与1个待测父本构成一个测交小区，每个小区播种1-2穴待测父本及4-5穴三种测交母本；小区大小为垂直垄向长80-130cm，平行垄向宽80-120cm；播种方式为穴播，第一垄播种顺序为第一测交母本、待测父本和第三测交母本，第二垄播种顺序为第二测交母本、待测父本和第三测交母本，播种量为每穴4粒，出苗后定苗2株；根据父、母本的开花期适当调整父、母本的播种时间，以确保父、母本开花期一致；测交恢复系的恢复能力时，可同时选1-2个配合力高的不育系播种在小区内与恢复系杂交配制少量杂交种子；

此种植方式仅代表在一个测交用网室内分穴播种一份父本材料及多份母本材料，实际田间操作的播种顺序及穴距在满足材料能正常生长条件下可适当调整；“垄”在平播区也代表“行”；

4）架设测交用网室：

在测交父、母本开花前3-5天给每个测交小区上架设一个步骤2）的测交用网室，并除去网室内野生昆虫；

5）测交母本花粉败育率检查：