[发明专利]米诺环素在保护视网膜神经节细胞中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种米诺环素在保护视网膜神经节细胞中的应用。

背景技术

视网膜和视神经属于中枢神经系统的一部分。中枢神经系统的损害是不可逆转的,所以各种原因引起的视神经损伤,例如创伤、炎症和高眼压,都会导致视网膜神经节细胞(RGC)的损失，最终导致永久性视力下降甚至失明。目前临床上仍然缺乏有效的治疗视神经损伤药物。二甲胺四环素（米诺环素）是一种半合成四环素,已作为广谱抗生素安全用于临床治疗。

发明内容

本发明的目的是提供一种米诺环素在保护视网膜神经节细胞中的应用。

本发明提供米诺环素在制备保护视网膜神经节细胞的产品中的应用。

米诺环素在制备抑制和/或延迟视神经损伤后视网膜神经节细胞自噬的产品中的应用也属于本发明的保护范围。

米诺环素在制备抑制和/或延迟视神经损伤后视网膜神经节细胞凋亡的产品中的应用也属于本发明的保护范围。

米诺环素在制备治疗视网膜神经节细胞损伤的产品中的应用也属于本发明的保护范围。

米诺环素在制备治疗视神经损伤的产品中的应用也属于本发明的保护范围。

米诺环素在制备在视神经损伤后早期治疗视神经损伤的产品中的应用也属于本发明的保护范围。

米诺环素在制备抑制视网膜神经节细胞存活率下降的产品中的应用也属于本发明的保护范围。

米诺环素在制备视神经损伤后保护视网膜神经节细胞超微结构的产品中的应用也属于本发明的保护范围。

本发明证明，米诺环素在视神经损伤后早期通过调节自噬和NF-κB途径在一定程度上发挥神经保护作用,米诺环素在视神经损伤后的临床治疗上有很高的应用前景。

附图说明

图1为正常对照组小鼠和视神经钳夹损伤后第7天的生理盐水组小鼠的视网膜。

图2为视神经钳夹损伤后生理盐水组和米诺环素组的小鼠视网膜以及视网膜神经节细胞的密度。

图3为视神经钳夹损伤后第4天各组小鼠的RGCs的显微结构。

图4为视神经钳夹损伤后第4天的生理盐水组小鼠的RGCs的异常自噬泡。

图5为视神经钳夹损伤后小鼠视网膜内LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ的蛋白表达以及LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转化率。

图6为视神经钳夹损伤后小鼠视网膜内NF-κB1和NF-κB2的基因表达。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

清洁级健康雄性C57BL/6J小鼠（体重20g）购自由北京维通利华实验动物技术有限公司。

兔来源抗βIII-tubulin一抗购自Cell Signaling Technology公司，产品目录号为5568S。

山羊抗兔TRITC标记二抗购自KPL公司，产品目录号为03-15-06。

兔来源抗LC3B抗体购自美国Sigma公司，产品目录号为L7543。

大鼠来源GAPDH抗体购自美国Santa Cruz公司。

辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔IgG购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

辣根过氧化物酶标记的山羊抗大鼠IgG购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

qPCR Master Mix购自美国Promega公司，货号为A6001。

实施例1、米诺环素保护视网膜神经节细胞的研究

一、将清洁级健康雄性C57BL/6J小鼠在北京大学第一医院动物室屏障环境内饲养。小鼠随机分为三组：正常对照组（8只），生理盐水组（64只），米诺环素组（64只）。本动物实验通过北京大学第一医院伦理委员会审查。

二、视神经钳夹损伤与术后处理

小鼠视神经钳夹损伤模型是比较理想的研究RGC神经保护的模型。由于眼内血供并没有中断，视神经钳夹比其他模型如视神经横断模型等更有优势（Templeton JP,Geisert EE.A practical approach to optic nerve crush in the mouse.Mol Vis2012;18:2147-2152.）

(一)正常对照组的小鼠不予任何处理。