[发明专利]基于醇提法提取金银花提取物的酶法加工

说明书

技术领域

本发明属于药物制备技术领域，具体涉及中药材金银花提取物的一种新型加工方法。

背景技术

金银花提取物的主要指标性成分是绿原酸，即由咖啡酸与奎尼酸组成缩酚酸，异名为咖啡糅酸，化学名为3-0-咖啡酰奎尼酸，是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生一种苯丙素类化合物。

绿原酸具有清除自由基、抗菌消炎、抗病毒、降糖、降脂、保肝利胆等多种功效，近年来发现绿原酸类物质有抗癌、抗艾滋病的作用，可作为先导设计开发抗癌、抗艾滋病药物，同时，作为良好的抗氧化剂，绿原酸在医药、日用化工、食品等领域都有广泛的应用。

在我国，绿原酸的生产技术落后，大多采用乙醇法，产量低，应用范围不大，有些品种尚属空白，大量生产绿原酸对发展国民经济的生产具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提出一种能够提升绿原酸纯度、安全绿色，提高绿原酸利用率的一种新型金银花提取物的加工方法。

本发明实现目的的技术方案是：

一种新型金银花提取物的加工方法，包括以下组分及质量分数：金银花10—20份，纤维素酶70%乙醇溶液。

中药材金银花提取物的新型加工方法，步骤是：

(1)取经干燥粉碎后的样品5g，加30mL水；

(2)将纤维素酶配成含量为2.5%的标准酶液,在上述金银花样品中分别加0.5ml，1.0ml，1.5ml，2.0ml，2.5ml，45℃温度下酶处理2h；

(3)加入10倍量70%的乙醇，80℃水浴回流提取2次,每次2h,离心,收集上清液；

(4)真空减压浓缩至50mL,用0.2mol/L盐酸溶解并定容至100mL容量瓶中；

(5)在324nm处测定吸光度，定量。平行三次。

本发明的优点和有益效果为：

1.本发明创新了金银花提取物加工方法，该法绿原菌酸得率比乙醇回流法提高25.97%，充分体现了该法在金银花提取过程中的优势，是国内金银花提取加工的重大突破，为国内提取方法开辟了新途径。

2.本工艺提取条件较为温和，避免了绿原酸在高温条件下分解，大大地提高了绿原酸的产率。

3.本发明工艺简单、操作容易，涉及设备设施少，适合规模化生产和产业化等多种优点，应用于工业生产上切实可行,可为金银花中提取绿原酸的工业化大生产提供参考。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明作进一步详述，以下实施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。

首先确定最适的酶用量、酶解时间、温度对实验的影响，包括如下步骤：

酶的用量对绿原酸得率的影响

设置了0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5,4.0,4.5,5.0%10个水平纤维素酶用量对纤维素酶处理效果的影响,以不加酶液为对照,45℃条件下酶处理2h。

酶解时间对绿原酸得率的影响

金银花样品中加1.0ml酶液,酶解温度45℃,酶解时间0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5h金银花提取物的平均得率和绿原酸得率。

酶处理温度对绿原酸得率的影响

设置了25℃,30℃35℃，40℃,45℃,50℃,55℃,60℃8个水平研究温度对纤维素酶处理效果的影响,试验时每个金银花样品加酶液1.0ml,酶处理2h。

实验结果表明：当酶用量为2.5%时，绿原酸得率最高；酶解时间2小时时绿原酸得率最高；纤维素酶处理的最适温度范40℃-50℃，在45℃时绿原酸得率最高，当高于50℃时，绿原酸得率降低，可以看出，纤维素酶的最适温度为45℃。

实施例1：

金银花，纤维素酶，乙醇

(1)取经干燥粉碎后的样品5g，加30ml水；

（2）将纤维素酶配成含量为2.5%的标准酶液,在上述金银花样品中分别加0.5ml，1.0ml，1.5ml，2.0ml，2.5ml，以不加酶液为对照，45℃温度下酶处理2h。

(3)加入10倍量70%的乙醇，80℃水浴回流提取2次,每次2h,离心,收集上清液；

(4)真空减压浓缩至50ml,用0.2mol/L盐酸溶解并定容至100ml容量瓶中；

(5)在324nm处测定吸光度，定量，平行三次。

实施例2：

金银花，纤维素酶，乙醇

(1)取经干燥粉碎后的样品5g，加30mL水；