[发明专利]小麦矮杆基因RhtDC20紧密连锁的SSR标记Xgwm537及其用途有效
申请号: | 201410098895.7 | 申请日: | 2014-03-17 |
公开(公告)号: | CN103834647A | 公开(公告)日: | 2014-06-04 |
发明(设计)人: | 刘录祥;郭会君;向小华;谢永盾;赵林姝;张昕;古佳玉;李军辉;赵世荣 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司 11129 | 代理人: | 吴泳历 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 小麦 基因 rht sub dc20 紧密 连锁 ssr 标记 xgwm537 及其 用途 | ||
1.小麦矮杆基因RhtDC20紧密连锁的SSR标记Xgwm537,其上游引物的核苷酸序列为:5’ACA TAA TGC TTC CTG TGC ACC3’;下游引物的核苷酸序列为:5’GCC ACT TTT GTG TCG TTC CT3’,扩增的特征条带的长度为207bp。
2.一种筛选具有矮杆基因RhtDC20的小麦材料的方法,其步骤如下:
(1)检测:采用所述SSR标记Xgwm537的上、下游引物对待测小麦材料的基因组进行PCR扩增和检测,
(2)结果判断:扩增结果中出现长度为207bp所示的特征条带的材料为具有矮杆基因RhtDC20的小麦材料,
所述SSR标记Xgwm537的上游引物的核苷酸序列为:5’ACA TAA TGC TTC CTG TGC ACC3’;下游引物的核苷酸序列为:5’GCC ACT TTT GTG TCG TTC CT3’。
3.根据权利要求2所述的方法,所述PCR扩增的反应体系为15μL,包括1×PCR Buffer(含Mg2+),0.25mM dNTPs,250nM引物,1U Taq DNA聚合酶,100ng基因组DNA,超纯水补足至15μL。
4.根据权利要求2或3所述的方法,所述扩增的程序为:95℃预变性4min,94℃变性1min;60℃退火1min,72℃延伸1min,35个循环;72℃延伸10min。
5.根据权利要求2~4任一所述的方法,所述检测指扩增产物变性后用6.0%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,80W恒功率电泳80min,快速硝酸银染色观察。
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