[发明专利]高灵敏检测过敏原特异性抗体IgE的试剂盒及方法

权利要求书

1.一种高灵敏检测过敏原特异性抗体IgE的试剂盒，主要包括：固化有待测过敏原蛋白的纤维材料膜，双生物素-链霉亲和素优化液，生物素偶联的抗人IgE抗体，生物素或链霉亲和素标记的多聚酶，以及与所述多聚酶对应的底物显色剂；所述双生物素-链霉亲和素优化液为双生物素：链霉亲和素摩尔浓度比24～39:18的混合物溶液，所述人IgE抗体为羊抗人IgE抗体或兔抗人IgE抗体，所述多聚酶为多聚碱性磷酸酶或多聚辣根过氧化物酶。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述纤维材料膜固置于反应槽的加液孔中。

3.利用权利要求1或2所述试剂盒高灵敏检测过敏原特异性抗体IgE的方法，所述方法包括如下顺序步骤：

（1）取加液孔内固置有固化有待测过敏原蛋白的纤维材料膜的反应槽，室温下水平放置，备用；

（2）将200～400μL血清或血浆加入1～2mL样品稀释液中，混匀后加入反应槽的加液孔内，将反应槽置于混匀器上，室温孵育30～60分钟；

（3）用洗涤液冲洗液反应槽，重复清洗3～5次，每次10～30秒；

（4）将200～400μL生物素偶联的抗人IgE抗体工作液加入1～2mL样品稀释液中，混匀后加入反应槽内，置于混匀器上室温孵育30～60分钟；

（5）用洗涤液冲洗液反应槽，重复清洗3～5次，每次10～30秒；

（6）在反应槽内加入1～3ml双生物素-链霉亲和素优化液，置于混匀器上室温孵育10～20分钟；

（7）用洗涤液冲洗液反应槽，重复清洗3～5次，每次10～30秒；

（8）在反应槽内加入1～3ml生物素或链霉亲和素标记的的多聚碱性磷酸酶工作液，置于混匀器上室温孵育10～30分钟；

（9）用洗涤液冲洗液反应槽，重复清洗3～5次，每次10～30秒；

（10）在反应槽内加入1～2ml稀释的底物显色剂溶液，置于混匀器上室温孵育10～20分钟；

（11）流水冲洗终止酶反应；

（12）将反应槽与比色卡比对判读，或者用阅读仪进行判读。