[发明专利]一种鳄嘴花抗癌活性部位的提取方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于抗癌活性部位提取领域，尤其涉及一种鳄嘴花抗癌活性部位的提取方法与应用。 

背景技术

鳄嘴花（Clinacanthus nutans（Burm. f.）Lindau），俗称优（忧）遁草、竹枝黄、扭序花等，属于爵床科鳄嘴花属，是东南亚传统药物中广泛应用的药用植物，分布在中南半岛、马来半岛以及中国大陆的广西、广东、云南、海南等地（中华本草（7），上海科学技术出版社，1999，456-457）。在马来西亚，泰国等地，鳄嘴花作为一种传统的药材用于治疗精神紧张、糖尿病、类风湿性关节炎、蛇叮咬、肝炎以及抗病毒等（Wanikiat P, et al., J. Ethnopharmacol., 2008, 116(2): 234-244; Yoosook, C.et al., J. Ethnopharmacol., 1999, 67(2):  179-187; ），其中，鳄嘴花叶子的提取物可以作为消炎药治疗蚊虫叮咬，作为补救措施治疗皮肤疱疹和病毒病变的水痘带状疱疹。此外，鳄嘴花中的叶绿素a和叶绿素b衍生物有抗疱疹病毒的活性（Sakdarat S, et al., Bioorg. Med. Chem., 2009, 17(5):1857-1860）。 

随着现代医学的发展，研究者发现鳄嘴花还具有抗肿瘤作用并因此倍受医药研究人员的重视（Yong YK, et al., Evid-Based Compl. Alt., 2013, ID 462751），但是，目前鳄嘴花抗癌成分及作用机理尚不明确，鳄嘴花的抗癌研究有待深入进行。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种鳄嘴花抗癌活性部位的提取方法与应用，旨在解决鳄嘴花抗癌活性部位不明确导致抗癌效果不甚理想的问题。 

本发明中涉及的一种鳄嘴花抗癌活性部位的提取方法，包括以下步骤： 

（1）取鳄嘴花药材粉末1回流提取后，将水提取物减压浓缩，再加无水乙醇，过夜沉淀，且经离心后得到沉淀和上清液两部分，冷冻干燥沉淀部分得鳄嘴花多糖；上清液浓缩后过大孔吸附树脂，先水洗至无色，再用乙醇以洗脱，收集洗脱液，浓缩、冷冻干燥得水溶性部位；

（2）取鳄嘴花药材粉末2加入乙醇回流提取，将乙醇提取物的含水悬浮液，再依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯分级萃取，减压浓缩回收溶剂，得到乙酸乙酯部位；剩余水相提取液经正丁醇萃取，浓缩得正丁醇部位。

将所述鳄嘴花多糖、水溶性部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位中任意一个部位或任意几个部位按实际生药提取量合并混匀，即为鳄嘴花抗癌活性部位。 

其中，步骤（1）中所述回流提取为在100℃下用水回流提取两次，每次3小时；所述乙醇洗脱为80%～95%乙醇以5～20 mL/min流速洗脱；所述鳄嘴花药材粉末1、水1、无水乙醇和洗脱所用乙醇的质量体积比为60～80g：480～800mL：600～1000mL：2～10 BV；所述上清液浓缩至原体积的1/30～1/5。 

其中，步骤（2）中所述回流提取所用乙醇浓度为50%～80%；所述鳄嘴花药材粉末2和乙醇的质量体积比为70～90g：560～1080mL。 

优选地，在步骤（1）中，洗脱所用乙醇的量优选2～6 BV；所述上清液浓缩至原体积的1/20～1/5；所述洗脱流速为5～10 mL/min。 

优选地，在步骤（2）中，所述鳄嘴花药材粉末2和乙醇的质量体积比为1g：8～10 mL。 

优选地，所述大孔吸附树脂为HP-20大孔吸附树脂或XAD16N大孔吸附树脂。 

本发明进一步提供了上述鳄嘴花抗癌活性部位的应用，用于制备抗肿瘤药物。 

优选地，所述的鳄嘴花抗癌活性部位的应用，用于制备抗肿瘤的片剂、胶囊、口服液、注射液、颗粒剂等常见剂型。 

优选地，所述肿瘤包括肝、前列腺、肺、胃、淋巴瘤等癌症。