[发明专利]一种检测11种常见感染性腹泻病原体的基因芯片及其应用有效

申请号：	201410101768.8	申请日：	2014-03-18
公开（公告）号：	CN103911443A	公开（公告）日：	2014-07-09
发明（设计）人：	孙成铭;栾材富;刘杰;伊茂礼;李少君;吴金英;张守信;段丽君;孙隽;龚磊;张成林	申请（专利权）人：	烟台毓璜顶医院
主分类号：	C12Q1/68	分类号：	C12Q1/68;C12Q1/04
代理公司：	北京轻创知识产权代理有限公司 11212	代理人：	王澎
地址：	264099 山东***	国省代码：	山东;37
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摘要：
搜索关键词：	一种检测 11 常见感染性腹泻病原体基因芯片及其应用
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【权利要求书】：

1.一组针对十一种感染性腹泻病原体的基因芯片检测探针，包括副溶血弧菌探针、创伤弧菌探针、霍乱弧菌探针、溶藻弧菌探针、弗尼斯弧菌探针、志贺氏菌属探针、大肠杆菌探针、气单胞菌探针、沙门氏菌探针、弯曲菌探针，以及变形杆菌探针；其中，所述副溶血弧菌探针的序列选自SEQ ID NO：1-10中的任意一种或多种，所述创伤弧菌探针的序列选自SEQ ID NO：11-18中的任意一种或多种，所述霍乱弧菌探针的序列选自SEQ ID NO：19-30中的任意一种或多种，所述溶藻弧菌探针的序列选自SEQ ID NO：31-40中的任意一种或多种，所述弗尼斯弧菌探针的序列选自SEQ ID NO：41-51中的任意一种或多种，所述志贺氏菌探针的序列选自SEQ ID NO：52-64中的任意一种或多种，所述大肠杆菌探针的序列选自SEQ ID NO：65-76中的任意一种或多种，所述气单胞菌探针的序列选自SEQ ID NO：77-86中的任意一种或多种，所述沙门氏菌探针的序列选自SEQ ID NO：87-96中的任意一种或多种，所述弯曲菌探针的序列选自SEQ ID NO：97-107中的任意一种或多种，所述变形杆菌探针的序列选自SEQ ID NO：108-117中的任意一种或多种。

2.一种检测十一种感染性腹泻病原体的基因芯片，其特征在于，所述基因芯片上整合了权利要求1所述的基因芯片检测探针。

3.如权利要求2所述的基因芯片，其特征在于，所述基因芯片还包括芯片基片。

4.如权利要求3所述的基因芯片，其特征在于，所述芯片基片为氨基基片。

5.一种检测十一种感染性腹泻病原体的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）提取待测样本的模板DNA；

2）模板DNA的扩增与标记；

3）扩增标记产物与权利要求2-4任一权利要求所述基因芯片杂交；

4）杂交后的芯片扫描和结果判读。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤2）所述模板DNA的扩增采用通用PCR引物，所述通用PCR引物的序列如SEQ ID NO：118-119所示。

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤2）所述模板DNA的扩增，其扩增的聚合酶链反应的反应体系如下：

8.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤2）所述模板DNA的扩增，其扩增的聚合酶链反应程序为：94℃5min；然后按94℃30s，55℃30s，72℃90s做35个循环；最后72℃10min。

9.权利要求1所述针对十一种感染性腹泻病原体的基因芯片检测探针，以及权利要求2-4任一权利要求所述检测十一种感染性腹泻病原体的基因芯片在制备腹泻病原体检测制剂中的应用。