[发明专利]一种定量测定同型半胱氨酸的电化学试纸及其制备方法在审
申请号: | 201410103865.0 | 申请日: | 2014-03-19 |
公开(公告)号: | CN104931549A | 公开(公告)日: | 2015-09-23 |
发明(设计)人: | 谢爱武;陶克美 | 申请(专利权)人: | 深圳市艾瑞生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N27/26 | 分类号: | G01N27/26;G01N27/30 |
代理公司: | 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 | 代理人: | 黄冠华 |
地址: | 518000 广东省深圳市宝安区西*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 定量 测定 半胱氨酸 电化学 试纸 及其 制备 方法 | ||
1.一种定量测定同型半胱氨酸的电化学试纸,包括一绝缘基片、设置在绝缘基片上的工作电极和参考电极;所述绝缘基片上设有电回路,在绝缘基片的一端设有与读出仪表相连的导线,其特征在于,所述工作电极上喷涂有催化血液同型半胱氨酸反应的生物酶,以及一种能在酶催化反应中心和电极之间进行电子传递的导电介质和粘合剂。
2.根据权利要求1所述的电化学试纸,其特征在于,所述生物酶为同型半胱氨酸甲基转移酶或D-蛋氨酸氧化酶。
3.根据权利要求1所述的电化学试纸,其特征在于,所述工作电极和参考电极均为双层导电薄膜,包括碳涂层和设置在碳涂层与绝缘基片之间的导电银层。
4.根据权利要求1所述的电化学试纸,其特征在于,所述碳涂层中含有1.2-2.5wt%的粘合剂、10-20wt%的导电介质、以及余量的导电碳材料。
5.根据权利要求1或4所述的电化学试纸,其特征在于,所述导电介质为苯醌、铁氰化钾或二茂铁甲酸。
6.根据权利要求1或4所述的电化学试纸,其特征在于,所述粘合剂为羟乙基纤维素、羟甲基纤维素和聚乙二醇中的一种或多种。
7.根据权利要求1所述的电化学试纸,其特征在于,所述绝缘基片为聚氯乙烯、聚酯或聚碳酸酯。
8.一种权利要求1所述的定量测定同型半胱氨酸的电化学试纸的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1,导电碳材料的制备:导电碳墨中加入1.2-2.5wt%的粘合剂,加入10-20wt%的能在酶催化反应中心和电极之间进行电子传递的导电介质,混匀备用;
生物酶液的制备:将生物酶加入到50-120mmol/L的磷酸缓冲液中,同时添加在酶催化反应中心和电极之间进行电子传递的导电介质,其中,磷酸缓冲液中生物酶的活性浓度为20-100国际单位/L,导电介质的浓度为200-800mg/L;
步骤2,参考电极的制备:通过丝网印刷技术将导电银材料和导电碳材料印在绝缘基片上,得到参考电极;
工作电极的制备:通过丝网印刷技术将导电银材料和导电碳材料印在绝缘基片上,然后喷涂印刷生物酶液,得到工作电极。
9.根据权利要求8所述的制备方法,其特征在于,通过丝网印刷技术将导电银材料和导电碳材料印在绝缘基片上的具体操作为:
1)将100-300目数的金属或尼龙聚酯材料丝网固定在方型轻质金属框加上,在暗室内涂上感光胶,干燥备用;
2)将计算机绘制的工作电极和参考电极负片置于感光胶上,于10-30瓦紫外灯下曝光10-20分钟,用高压水枪冲洗去被电极负片覆盖的未硬化感光胶,干燥后形成丝印模板;
3)将带有工作电极和参考电极图形的丝印模板安装于自动丝印机上备用;
4)将导电银材料和导电碳材料印在绝缘基片上。
10.根据权利要求8所述的制备方法,其特征在于,磷酸缓冲液中生物酶为同型半胱氨酸甲基转移酶,其活性浓度为50-100国际单位/L,或者所述生物酶为D-蛋氨酸氧化酶,其活性浓度为20-50国际单位/L。
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