[发明专利]细胞侵袭趋化模型及其制备方法

权利要求书

1.一种细胞侵袭趋化模型的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）细胞培养：培养待研究的肿瘤细胞，吸取含有5x10⁵-1x10⁶个所述肿瘤细胞的细胞悬浮液备用；

（2）下层基质胶配置：

将基质胶与肿瘤细胞培养基以体积比3:2-1:1配置，混匀，加入胎牛血清，胎牛血清体积百分比浓度为8-12%，得基质胶A；

取60-80ul所述基质胶A加入PCR薄壁管中作为下层基质胶，进行培养；

（3）maker1配置：

取maker，灭菌后加到如（2）所述的基质胶A内，得基质胶B；

再吸取所述基质胶B均匀铺设一层在所述下层基质胶上，为maker1，进行培养；

（4）中间细胞层配置：

将步骤（1）中细胞悬浮液进行离心沉淀，弃掉上清液，将沉淀得到的肿瘤细胞加入50-70ul所述基质胶A内混匀，得中间细胞层；

将所述中间细胞层均匀铺设在所述maker1上，进行培养；

（5）maker2配置：

吸取步骤（3）中所述基质胶B，均匀铺设一层在所述中间细胞层上，为maker2，进行培养；

（6）上层基质胶配置：在50-70ul基质胶A中加入终浓度为3ng/8ul-1ng/ul待研究的趋化因子或细胞，混匀后得上层基质胶；

将所述上层基质胶均匀铺设在所述maker2上，置于培养箱中培养72小时至7天，即可。

2.如权利要求1所述的细胞侵袭趋化模型的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）细胞培养为：培养待研究的肿瘤细胞，当所述肿瘤细胞长至80%-90%时进行消化，制成细胞悬浮液，而后吸取含有5x10⁵-1x10⁶个所述肿瘤细胞的细胞悬浮液备用。

3.如权利要求1所述的细胞侵袭趋化模型的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中吸取5.0x10⁵-5.5x10⁶个所述肿瘤细胞备用。

4.根据权利要求1-3任一项所述的细胞侵袭趋化模型的制备方法，其特征在于，所述肿瘤细胞为大肠癌细胞sw480。

5.根据权利要求4所述的细胞侵袭趋化模型的制备方法，其特征在于，所述待研究的趋化因子或细胞为humanTGF-Beta1-Mammalian。

6.根据权利要求1-3任一项所述的细胞侵袭趋化模型的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）～（5）中的培养为将所述PCR薄壁管置于37±2℃的5±0.5%CO₂培养箱中25-35min。

7.一种根据权利要求1-6制备方法制备所得的细胞侵袭趋化模型。