[发明专利]SLC2A9基因单核苷酸多态性的检测

权利要求书

1.一种检测SLC2A9基因单核苷酸多态性位点rs1014290的试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括用于特异性扩增SLC2A9基因单核苷酸多态性位点rs1014290的若干个特异性引物对，所述引物对含有SLC2A9基因单核苷酸多态性位点rs1014290的上游或者下游至少15个连续的核苷酸构成的连续核苷酸序列，所述SLC2A9基因单核苷酸多态性位点rs1014290具有SEQ ID No：5的连续核苷酸序列或者具有SEQ ID No：6的连续核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述引物为SEQ ID No：1～4序列之一的正向引物或反向引物。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述试剂盒还包括与引物序列构成PCR反应体系的Pfu缓冲液、dNTPs、MgSO₄、Pfu DNA聚合酶、模板DNA，所述PCR反应体系终浓度组成为：

4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述试剂盒还包括与引物序列构成PCR反应体系的Pfu缓冲液、dNTPs、MgSO₄、Pfu DNA聚合酶、模板DNA、荧光染料；所述PCR反应体系的终浓度组成为：

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述荧光染料可选自DNA饱和性染料包括EvaGreen染料、PLUS染料、ResoLight染料、SYTO9染料、SYBR green染料；所述dNTP混合液包括10mM dATP、10mM dCTP、10mM dTTP、10mM dGTP的混合液。

6.一种检测SLC2A9基因单核苷酸多态性位点rs1014290的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：

（1）设计并选取包括含有SLC2A9基因单核苷酸多态性位点rs1014290的上游或者下游至少15个连续的核苷酸构成的连续核苷酸序列构成的若干个引物对；

（2）提取模板DNA，利用步骤（1）得到的引物对对模板DNA中SLC2A9基因单核苷酸多态性位点rs1014290进行PCR扩增；

（3）对扩增后的SLC2A9基因单核苷酸多态性位点rs1014290的单核苷酸多态性进行检测。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述步骤（2）中提取模板DNA从选自外周血细胞、外周血血清或血浆、体液、腔道的脱落物、病变新鲜组织、冰冻病变切片、石蜡病变切片中提取；进行PCR反应的条件为92～97℃预变性4～15min；92～97℃变性10～30s，56～60℃退火10～30s，70～75℃延伸10～30s，30～60个循环。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述步骤（3）中先用琼脂糖凝胶电泳分离步骤（2）的扩增产物，然后将扩增产物进行基因测序，获得扩增后的SLC2A9基因单核苷酸多态性位点rs1014290的单核苷酸多态性检测结果。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述步骤（2）中PCR扩增是采用实时荧光PCR技术进行扩增，检测步骤（2）的扩增产物，根据荧光信号的强度判断扩增后的SLC2A9基因单核苷酸多态性位点rs1014290的单核苷酸多态性结果。

10.一种PCR反应试剂盒在SLC2A9基因单核苷酸多态性位点rs1014290的单核苷酸多态性检测方面的应用。