[发明专利]一种芽孢杆菌的发酵培养方法

权利要求书

1.一种芽孢杆菌的发酵培养方法，其特征在于：

1）菌种活化：将菌种在培养基中于30-37℃下活化培养24-48小时，待长出单菌落后，转接至固体斜面培养基上，培养得到菌体，待用；

2）摇瓶发酵培养：将活化后的菌株制成菌悬液，而后按1-5%体积的接种量将芽孢杆菌菌悬液接种到摇瓶发酵培养基中，以200-300转/分钟的转速，30-37℃振荡培养15-24小时，即得摇瓶发酵培养液；

3）种子罐培养：将摇瓶发酵培养液按1%-5%体积接种量接入种子罐中，以0.8-1.5vvm的通气量通入无菌空气在30℃-37℃、搅拌速率200-300rpm、罐压0.03-0.05Mpa、发酵培养16-24小时，得种子培养液；

4）发酵罐培养：按4%-5%体积的接种量将种子培养液接入发酵罐中，以0.8-1.5vvm的通气量通入无菌空气在30℃-37℃、搅拌速率200-300rpm、罐压0.05-0.1Mpa、发酵培养48小时，得到芽孢杆菌发酵液。

2.按权利要求1所述芽孢杆菌的发酵培养方法，其特征在于：所述培养基和固体斜面培养基成分为牛肉膏0.3-0.5克、蛋白胨0.8-1.2克、氯化钠0.3-0.5克、琼脂1.5-2克，pH7.0-7.5，水100mL。

3.按权利要求1所述芽孢杆菌的发酵培养方法，其特征在于：所述步骤2）将活化后的菌株加入到无菌水中制成菌悬液，并调节菌悬液菌数为10⁸个/mL。

4.按权利要求1所述芽孢杆菌的发酵培养方法，其特征在于：所述步骤2）摇瓶发酵培养基的成分为：牛肉膏0.3-0.5克、蛋白胨0.8-1.2克、氯化钠0.3-0.5克、pH7.0-7.5，水100mL。

5.按权利要求1所述芽孢杆菌的发酵培养方法，其特征在于：所述步骤3）中种子罐在121℃下蒸汽空消灭菌30分钟，装入种子培养基后再121℃蒸汽灭菌30分钟，保压降温至30℃-37℃，而后接种摇瓶发酵培养液，种子培养基装量为罐体积的60-70%。

6.按权利要求1或5所述芽孢杆菌的发酵培养方法，其特征在于：所述种子培养基成分为：蔗糖0.5-1克、蛋白胨0.8-1.2克、氯化钠0.3-0.5克、pH7.0-7.5，水100mL。

7.按权利要求1所述芽孢杆菌的发酵培养方法，其特征在于：所述步骤4）中发酵罐在121℃下蒸汽空消灭菌30分钟，装入发酵培养基后再121℃蒸汽灭菌30分钟，保压降温至30℃-37℃，而后接种种子培养液，发酵培养基装量为罐体积的60-70%。

8.按权利要求1或7所述芽孢杆菌的发酵培养方法，其特征在于：所述发酵培养基成分为：蔗糖2克、蛋白胨1克、磷酸二氢钾0.2克、硫酸镁0.05克、硫酸亚铁0.01克、硫酸锌0.005克、NaCl0.5克、水100ml、pH7.0。