[发明专利]一种多西紫杉醇的核酸适配体、核酸适配体衍生物及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种核酸适配体、核酸适配体衍生物及其用途，具体涉及一种可结合多西紫杉醇的核酸适配体、核酸适配体衍生物及其用途。

背景技术

多西紫杉醇（Docetaxel）属于紫杉烷类抗肿瘤药，主要干扰细胞有丝分裂及分裂期间所需的微管网络，起到抗肿瘤效果，其不良反应主要表现为过敏反应，血小板减少，心动过速，低血压，神经毒性反应，胃肠道反应以及皮肤毒性反应等。多西紫杉醇水溶性小，市售药物泰索帝采用吐温-80增溶，乙醇助溶，会引发过敏反应、溶血反应等副作用，在临床应用中存在潜在风险，因此，如何降低泰索帝副作用、提高临床疗效已成为亟待解决的问题。另外，由于多西紫杉醇的结构特性，使其摩尔吸光系数较低，难以运用简单的低成本光谱方法进行高灵敏的微量定量分析。

核酸适配体（aptamer）是通过指数富集配体的系统进化技术（SELEX）筛选得到的，能特异结合靶物质的单链寡聚核苷酸（ssDNA或ssRNA）。核酸适配体与抗体功能类似，但是与抗体相比具有更多的优势，如具有更高的亲和力与特异性，无免疫原性，能够化学合成，成本低，可进行标记，稳定性好，易于保存等优点。核酸适配体的靶分子更为广泛，包括金属离子、氨基酸、核酸、多肽、蛋白质等，并能从单一靶标扩展至完整的病毒颗粒及细胞等复合物靶标。

但是，目前尚未发现与多西紫杉醇具有高亲和力且低成本的核酸适配体。如果获得一种多西紫杉醇核酸适配体，将有望提供一种新的研究多西紫杉醇的手段以及拓展多西紫杉醇的应用范围。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种能够与多西紫杉醇高特异性和高亲和力结合、无免疫原性、能够化学合成、生物相容性好、分子量小、稳定、易于保存的多西紫杉醇的核酸适配体、核酸适配体衍生物及其用途。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为一种多西紫杉醇的核酸适配体，所述核酸适配体的核苷酸序列包括以下序列1或序列2所示的DNA片段：

序列1：

5’-TTCCAAACGTCCACCGCCAAAA-3’；

序列2（即序列1的反向序列）：

5’-AAAACCGCCACCTGCAAACCTT-3’。

上述的核酸适配体中，所述核酸适配体的核苷酸序列上的某一位置被磷酸化、氧甲基化、甲基化、氨基化、巯基化或同位素化。

上述的核酸适配体中，所述核酸适配体的核苷酸序列上结合有生物素、地高辛、荧光物质（如FITC等）、纳米发光材料、聚乙二醇、肽段、蛋白、酶或叶酸标记（甚至连接上放射性和治疗性物质等）。

以上不论是经部分取代还是经过修饰后的核苷酸序列，都具有原核酸适配体基本相同或类似的分子结构、理化性质和功能，都可用于与多西紫杉醇特异性的结合。

作为一个总的技术构思，本发明提供一种多西紫杉醇的核酸适配体，所述核酸适配体的核苷酸序列包括以下三种序列中的任意一种：

（1）与上述所列核酸适配体的核苷酸序列的同源性在60%以上（例如可将上述核酸适配体序列删除或增加部分互补的核苷酸）；

（2）与上述所列核酸适配体的核苷酸序列进行杂交的序列；

（3）上述所列核酸适配体的核苷酸序列转录的RNA序列。

作为一个总的技术构思，本发明还提供一种多西紫杉醇的核酸适配体衍生物，所述核酸适配体衍生物是上述所列核酸适配体的核苷酸序列的骨架衍生出的硫代磷酸酯骨架，或者是上述所列核酸适配体改造成的相应锁核酸或肽核酸。

以上不论是衍生出的核酸适配体还是衍生出的其他衍生物，都具有原核酸适配体基本相同或类似的分子结构性质和功能，即都可用于与多西紫杉醇特异性结合。

作为一个总的技术构思，本发明还提供一种上述的核酸适配体或者上述的核酸适配体衍生物在用于药物载体中的用途。

作为一个总的技术构思，本发明还提供一种上述的核酸适配体或者上述的核酸适配体衍生物在药物设计与开发中的用途。

作为一个总的技术构思，本发明还提供一种上述的核酸适配体或者上述的核酸适配体衍生物在药物分离与纯化中的用途。

作为一个总的技术构思，本发明还提供一种上述的核酸适配体或者上述的核酸适配体衍生物在制备药物及其他制品中的用途。

作为一个总的技术构思，本发明还提供一种上述的核酸适配体或者上述的核酸适配体衍生物在制备多西紫杉醇检测探针中的用途。