[发明专利]枯草芽孢杆菌菌株及其应用有效
申请号: | 201410111740.2 | 申请日: | 2014-03-25 |
公开(公告)号: | CN103865855B | 公开(公告)日: | 2017-03-29 |
发明(设计)人: | 李霜;刘强;黄和;江凌 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P21/00;C12R1/125 |
代理公司: | 江苏致邦律师事务所32230 | 代理人: | 徐蓓 |
地址: | 211186 江苏省南京市浦口*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 枯草 芽孢 杆菌 菌株 及其 应用 | ||
1.一株枯草芽孢杆菌,其分类命名为枯草芽孢杆菌G-34(Bacillus subtilis G-34),于2014年1月6日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏登记号为CCTCC NO:M2014003。
2.一种生产脂肽类生物表面活性剂的方法,利用权利要求1所述的枯草芽孢杆菌G-34(Bacillus subtilis G-34)菌株进行发酵得到脂肽类生物表面活性剂产品,其特征在于,菌株在发酵过程中,可利用甘油作为唯一碳源。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,发酵过程的具体步骤为:
a)取诱变后筛选获得的原始菌株,使用LB斜面培养基进行活化;
b)取步骤a获得的菌体用于扩大培养,扩大培养条件为30~45℃、pH 7.0~8.0,培养时间为12-24h,扩大培养级数为1-3级;
c)按照体积百分比2%~10%的接种量将步骤b获得菌体接种于发酵培养基中,培养条件为30~45℃、pH 7.0~8.0,培养条时间为24-36h。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述扩大培养基或发酵培养基含有甘油、玉米糖化醪、糖蜜、葡萄糖、甜高粱茎秆汁或木质纤维素原料酶解液中的一种或几种做为碳源,含有黄豆饼粉、玉米饼粉、玉米浆、鱼粉、酵母膏、酵母浸粉、蛋白胨、硝酸铵、硫酸铵、硝酸钾、氨水、尿素中的一种或几种做为氮源;并且含有、无机盐、氨基酸、微量元素。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述无机盐选自磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸氢二铵中的一种或几种,优选为磷酸二氢钾和/或磷酸氢二铵。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述培养基包括铜、钙、铁、锌、铅、银、铬、锰、镁、菸酸、吡哆酸、硫胺和/或泛酸钙在内的多种微量元素。
7.根据权利4所述的培养基,其特征在于,所选碳源浓度以培养基中的葡萄糖计,其含量为1-200 g/L,优选40-80g/L;所选氮源浓度为0.5-20 g/L,优选2-10 g/L。
8.根据上述任一权利要求所述的方法,其特征在于,所述甘油除来源于化学法合成甘油外,还包括化学法、生物法或超临界法生产生物柴油生产过程中的粗甘油。
9.权利要求1所述的菌株在发酵制备脂肽类表面活性剂中的应用。
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