[发明专利]一种通过温度转换发酵生产含γ‑亚麻酸油脂的方法

权利要求书

1.一种通过温度转换发酵生产含γ-亚麻酸油脂的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）菌种筛选：将冷藏贮存小克银汉霉菌（C.echinulata ATCC7929）接种于PDA平板培养基中，于20～40℃培养1～4d，再从PDA平板培养基中，将菌丝形态与长势较优的菌块接种于新PDA平板培养基中，于20～40℃再培养1～4d，然后冷藏贮存备用；

2）菌种活化培养：将冷藏贮存备用的新PDA平板培养基上的菌块接种于另一新的PDA平板培养基中，于20～40℃培养1～4d，观察菌落形态；

3）摇瓶种子培养：将步骤2）中所述另一新的PDA平板培养基上的菌块接种于装有种子培养基的摇瓶中，pH值调至5～7，于20～30℃，以100～250rpm培养1～3d，得摇瓶种子；

4）摇瓶发酵培养：将步骤3）所得摇瓶种子接种于装有发酵培养基的摇瓶中，pH值调至5～7，先于30～40℃培养6～8d，转速为100～250rpm，再于10～20℃培养4～6d，转速为100～250rpm，得发酵液；

5）将步骤4）所得发酵液抽滤，以去离子水润洗，得湿菌体，将湿菌体烘干、研磨、萃取，得到含γ-亚麻酸油脂。

2.如权利要求1所述一种通过温度转换发酵生产含γ-亚麻酸油脂的方法，其特征在于，在步骤1）中，所述PDA平板培养基的组成为马铃薯浸提液200g/L,葡萄糖20g/L，琼脂15～20g/L，自然pH值。

3.如权利要求1所述一种通过温度转换发酵生产含γ-亚麻酸油脂的方法，其特征在于，在步骤3）中，所述种子培养基的组成为葡萄糖80g/L，尿素6g/L，硫酸铵5g/L，酵母粉1g/L，磷酸二氢钾5g/L，硫酸镁1g/L，生物素0.06mg/L，灭菌前pH值为6。

4.如权利要求1所述一种通过温度转换发酵生产含γ-亚麻酸油脂的方法，其特征在于，在步骤4）中，所述发酵培养基的组成为葡糖糖100g/L，蛋白胨6g/L，酵母粉5g/L，硝酸钠2g/L，磷酸二氢钾3g/L，硫酸镁0.5g/L，灭菌前pH值为6.5。