[发明专利]一株耐酸长双歧杆菌JDY1017dpH及其应用

权利要求书

1.一株耐酸长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)JDY1017dpH，其保藏登记号为CGMCC No.8371，其16S rRNA基因部分核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.如权利要求1所述的长双歧杆菌JDY1017dpH，其特征在于，所述长双歧杆菌JDY1017dpH具有以下特性：

(1)优势的耐酸性能

经pH3.5处理4h后，每毫升菌液活菌数的对数值log CFU／ml＝为7.53±0.41，其耐酸性能明显优于普通菌株；

(2)耐酸性能具有遗传稳定性

新筛选到的菌株JDY1017dpH经pH3.5处理4h后，其每毫升菌液活菌数的对数值log CFU／ml＝7.12±0.10，连续传代20次并经pH3.5处理4h后，其每毫升菌液活菌数的对数值log CFU／ml＝7.57±0.15；

(3)不同的细胞膜脂肪酸含量百分比

新筛选到的菌株JDY1017dpH的C16∶0和C16∶1脂肪酸含量百分比分别为24.786±1.162和5.460±0.908，显著低于普通菌株；而C18∶0、C18:1和cycC19∶0脂肪酸含量百分比分别为4.281±0.521、44.066±1.844和11.342±0.996，显著高于普通菌株；平均碳链长度为17.085±0.049，显著长于普通菌株；

(4)具有更低的细胞膜流动性

新筛选到的菌株JDY1017dpH细胞膜的微粘度r＝0.135±0.006，明显高于普通菌株，即细胞膜流动性明显低于普通菌株。

3.权利要求1所述长双歧杆菌JDY1017dpH的获取方法，其特征在于，包括以下步骤：

A、将新鲜的健康青年人粪便5克用50ml粪便稀释液振荡成粪便匀浆液，将1ml粪便匀浆液接入9ml新鲜的pH7.4BL液体培养基中，37℃厌氧培养24h，用接种环挑取菌液在pH6.5的TPY固体培养基平板上划线，37℃厌氧培养24h后，挑取单菌落接种于50ml新鲜的pH7.4BL液体培养基中，37℃厌氧过夜培养至平台期后，7600g离心10min获得菌体，再将菌体转移至pH3.5新鲜的BL液体培养基中，37℃厌氧过夜培养后，7600g离心10min获得菌体；

B、再用pH7.4的磷酸缓冲液洗涤两次后，重悬于500μl pH7.4的磷酸缓冲液中，然后涂布于pH6.5的TPY固体培养基中，37℃厌氧培养3～4天至生长出单菌落，挑取单菌落进行镜检，确认达到菌株纯种分离，并分子鉴定该菌株为长双歧杆菌，命名为长双歧杆菌JDY1017dpH；

C、将长双歧杆菌JDY1017dpH以1％接种量接种于新鲜的pH7.4BL液体培养基中，37℃厌氧培养24h，即得长双歧杆菌JDY1017dpH菌株的发酵液。

4.如权利要求3所述的长双歧杆菌JDY1017dpH的获取方法，其特征在于，所述BL液体培养基、TPY固体培养基和磷酸缓冲液中均含有重量百分含量为0.05％的半胱氨酸盐酸盐。

5.如权利要求1所述的长双歧杆菌JDY1017dpH的应用，其特征在于：所述的长双歧杆菌JDY1017dpH菌株用于日常发酵食品、保健食品和药品的生产领域中。