[发明专利]一株耐酸短双歧杆菌BB8dpH及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物，具体涉及一株耐酸短双歧杆菌BB8dpH及其应用。

背景技术

人体胃肠道定植着各种细菌，根据其对人体健康的影响可分为有益菌、有害菌和中性菌。有益菌即对人体有益生作用的益生菌，其中双歧杆菌和乳杆菌是定植于人体胃肠道的最具代表性的益生菌。当益生菌占人体胃肠道优势数量时有利于人体健康。

双歧杆菌属于革兰氏阳性菌，是一种专性厌氧菌，无运动属性，生长周期中不产生芽孢，无荚膜和鞭毛。

双歧杆菌对环境pH的变化非常敏感。其最适生长pH为6.7～7.0，一旦高于8.0或低于5.0，双歧杆菌将停止生长。当处于低pH条件下，会导致细菌细胞大量的死亡，特别是人源性双歧杆菌酸耐受力非常差。

双歧杆菌对环境温度的变化也很敏感。当温度介于37～41℃时，生长最为迅速，当温度高于43℃或低于28℃时，其生长极其缓慢或停止生长。在生产应用中，双歧杆菌的最适温度为35～40℃。

双歧杆菌作为重要的益生菌，其对人体具有多种潜在的生理功能，如调节肠道菌群平衡、抗癌抗肿瘤、抑制致病菌、消炎、抗衰老、预防由抗生素引起的腹泻、降低胆固醇、缓解乳糖不耐症及增强机体免疫力等功能。

目前，随着双歧杆菌功能研究的深入，其在日常发酵食品、保健食品和药品等新产品开发中的应用越来越多。而双歧杆菌作为重要的益生菌，许多国家法规要求益生菌食品中的活菌数在保质期内必须达到106～108CFU/ml(g)。为了使其在人体胃肠道有效发挥益生功能，双歧杆菌必须具有良好的贮存稳定性和对胃肠道的耐受(如耐酸性等)性能。因此，对不利环境(如胃肠道环境)适应性更强的人源性双歧杆菌株是可应用的重要潜在菌株。

发明内容

本发明的目的，就是为了提供一株短双歧杆菌BB8dpH及其应用，短双歧杆菌BB8dpH具有优势的耐酸性能，且耐酸性具有遗传稳定性，以及具有不同的细胞膜脂肪酸含量百分比和低的细胞膜流动性，可作为潜在的益生菌菌株。

本发明的短双歧杆菌BB8dpH已于2013年10月18日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏登记号为CGMCC No.8370。其分类命名为：短双歧杆菌，拉丁名：Bifidobacterium breve。

为了实现上述目的，本发明的技术方案是：一株耐酸短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)BB8dpH，其保藏登记号为CGMCC No.8370，其16S rRNA基因部分核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

上述短双歧杆菌BB8dpH具有以下特性：

(1)优势的耐酸性能

经pH3.2处理3h后，每毫升菌液活菌数的对数值log CFU/ml＝为8.38±0.35，其耐酸性能明显优于普通菌株；

(2)耐酸性能具有遗传稳定性

新筛选到的菌株BB8dpH经pH3.2处理3h后，其每毫升菌液活菌数的对数值log CFU/ml＝8.62±0.51，连续传代20次并经pH3.2处理3h后，其每毫升菌液活菌数的对数值log CFU/ml＝9.11±0.04；

(3)不同的细胞膜脂肪酸含量百分比

新筛选到的菌株BB8dpH的C16∶0和C16∶1脂肪酸含量百分比分别为13.190±0.802和3.705±0.215，显著低于普通菌株；而C18∶0、C18∶1和cycC19∶0脂肪酸含量百分比分别为6.307±0.893、61.160±0.932和10.699±0.582，显著高于普通菌株；平均碳链长度为17.496±0.091，显著长于普通菌株；

(4)具有更低的细胞膜流动性

新筛选到的菌株BB8dpH细胞膜的微粘度r＝0.144±0.001，明显高于普通菌株，即细胞膜流动性明显低于普通菌株。

上述短双歧杆菌BB8dpH的获取方法包括以下步骤：