[发明专利]花鲈精液的处理方法有效
申请号: | 201410115175.7 | 申请日: | 2014-03-26 |
公开(公告)号: | CN103891711A | 公开(公告)日: | 2014-07-02 |
发明(设计)人: | 温海深;张美昭;柴森浩;韩龙江 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 266003 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 精液 处理 方法 | ||
1.一种花鲈精液的处理方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)将花鲈精液与抗冻液按体积比1:3比例稀释混匀;
(2)预冷处理,将稀释后的混合液在4℃预冷3分钟;
(3)预冷后以分段方式降温处理;
(4)分装保存;
其中,步骤1中所述抗冻液由稀释液、抗冻剂和添加剂组成;其中,稀释液为NaCl溶液:8.775g/L;抗冻保护剂的浓度为20%;添加剂为牛血清白蛋白:10g/L,葡萄糖:10g/L,土霉素:1g/L;
步骤3中,所述分段方式降温处理包括:首先将预冷处理后的混合液在液氮罐液面以上10cm停留5分钟,然后在液氮罐液面以上4cm停留5分钟,最后在液氮罐液面以上1cm停留3分钟后直接陷入液氮中长期保存。
2.根据权利要求1所述的花鲈精液的处理方法,其特征在于:在步骤4之后,还包括解冻步骤5,即将经液氮处理分装保存的花鲈冻精直接放入37℃水浴解冻50-60秒,期间不断摇动花鲈冻精,然后置于室温至完全融化,而后于自然海水中激活。
3.根据权利要求2所述的花鲈精液的处理方法,其特征在于:所述激活包括将解冻后的冻精置入经煮沸消毒并加有5%牛血清白蛋白的自然海水中进行激活。
4.根据权利要求1所述的花鲈精液的处理方法,其特征在于:在步骤1之前,还包括花鲈精液的获取,包括以下步骤:
(1)选取3-4龄,体重3-4kg的雄性花鲈亲鱼进行麻醉;
(2)按1000U/kg的量肌肉注射HCG;
(3)三天后采用腹部挤压法获得精液,取活力95%以上的花鲈精液。
5.根据权利要求1-5任一所述的花鲈精液的处理方法,其特征在于:所述抗冻保护剂为二甲亚砜。
6.根据权利要求1-5任一所述的花鲈精液的处理方法,其特征在于:步骤1中将花鲈精液与抗冻液按体积比1:3比例稀释混匀后,封装于冻存管中,所述冻存管为2ml的冻存管。
7.根据权利要求1-5任一所述的花鲈精液的处理方法,其特征在于:所述分段方式降温处理包括采用程序降温仪程序降温。
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