[发明专利]一种抗病毒化合物在制备抗HIV-1病毒药物中的应用

说明书

技术领域

    本发明涉及一种新的化合物，更具体地，涉及一种抗病毒化合物及其应用。

背景技术

    HIV-1病毒最初发现于1981年在美国发现，由一系列不明原因的，以细胞免疫缺陷为特征的综合征出现以后，研究人员开始了对其致病源的寻找。1983年法国研究小组从一淋巴肿大综合征病人的淋巴结中，分离出HIV-1病毒。它是一种感染人类免疫系统细胞的慢病毒，该病毒破坏人体的免疫力，导致免疫系统失去抵抗力，而导致各种疾病以及癌症得以在人体内生存，从而导致获得性免疫缺陷综合症——艾滋病。目前，由于对艾滋病教育的普及不充分，全球的HIV感染仍呈上升趋势，尤其在中国更是进入了快速增长期。尽快阻止艾滋病在我国的流行已成了一件刻不容缓的大事。因此，继续扩大我们对HIV-1致病机制的认识，开发出更有效，更经济，更少副作用的抗病毒药物以完全清除残余的HIV-1复制，以及开发出强有力而又长效的抗HIV-1的疫苗以保护易感人群，仍将是我们能否最终战胜艾滋病的关键。

发明内容

    本发明提供一种抗病毒化合物在制备抗HIV-1病毒药物中的应用，所述的抗病毒化合物的结构式如式I所示：

                                                      （式I）

      X为O或S。

    所述的抗病毒化合物包括式I所述的化合物的可接受的药用盐。

    所述的药用盐为钠盐、钾盐或钙盐。

    本发明具有以下优点：

    运用HIV-1 Vif蛋白可以通过泛素化降解A3G蛋白的功能特性，证实上述通式的抗病毒化合物能够抑制Vif蛋白降解A3G的活性，导致筛选系统中绿色荧光蛋白的表达量将回升。通过在人的原代CD4+ T淋巴细胞以及H9、SupT 1等CD4+ T淋巴细胞系中进行野生型HIV-1病毒的感染实验证实，他们均具有较好的抗病毒作用，为进一步的抗病毒药物研发提供的强有力的理论基础和实践基础，具有重要的研发价值和开发意义。

附图说明

图1为细胞筛选模型的构建原理。

图2为细胞筛选模型的构建原理。

图3： 抗病毒化合物具有抑制Vif活性的作用。

图4：抗病毒化合物在表达A3G蛋白的H9细胞和不表达A3G蛋白的SupT1细胞中抑制野生型HIV-1的复制效果。

具体实施方式

下面结合具体实施例进一步详细说明本发明。除非特别说明，本发明采用的试剂、设备和方法为本技术领域常规市购的试剂、设备和常规使用的方法。

实施例1

Vif是HIV的必需蛋白之一，其主要功能是拮抗宿主中天然的抗病毒因子APOBEC3G。APOBEC3G是H IV-1病毒的一大威胁，它存在于HIV-1天然的宿主细胞（如CD4+ T细胞和巨噬细胞）中，能被包裹入HIV-1病毒颗粒，在HIV-1逆转录过程中发挥其极强的抗病毒作用。为此， HIV-1自身编码了Vif蛋白来特异性对抗APOBEC3G的抗病毒活性，它可将APOBEC3G导入泛素系统并将其降解（图1）。因此，如何灭活Vif，是研发抗HIV-1病毒药物的一个十分重要的靶标。

根据Vif拮抗APOBEC3G的分子机理，筛选出若干可让HIV的Vif无法降解 APOBEC3G的小分子药物。为此我们将建立一种简便的活细胞筛选系统，如图2所示，将表达APOBEC3G-GFP融合蛋白和表达Vif的 质粒共转染到细胞中。以APOBEC3G-GFP融合蛋白是否被降解为指标。只要某种化合物在Vif存在的情况下还能使APOBEC3G-GFP融合蛋白不被降解（即GFP荧光还在），该化合物就是Vif的抑制剂。通过对Vif靶标的进一步鉴定，确认化合物是作用于宿主细胞还是作用在病毒蛋白的Vif上。

 图1将表达 HIV Vif 蛋白 的质粒和表达 APOBEC3G（A3G）-GFP 融合蛋白的质粒共转染细胞，VIF蛋白会结合A3G-GFP, 同时结合由Cul5、EloB和EloC构成的蛋白质复合体E3。E3是一个泛素化酶，会在A3G-GFP蛋白上打上泛素标签，从而介导A3G-GFP进入蛋白酶体发生降解，导致观察不到绿色荧光。

图2 当加入待筛的化合物库后,库中的某种化合物抑制了 Vif 的功能，A3G-GFP 融合蛋白能正常表达，可观察到明显的绿色荧光，该种化合物就是Vif抑制剂，可进一步开发成为有抗病毒活性的先导化合物。