[发明专利]凝结芽孢杆菌和干酪乳杆菌复合菌剂的制备

权利要求书

1.一种凝结芽孢杆菌和干酪乳杆菌复合菌剂，其制备方法包括凝结芽孢杆菌HM-09和干酪乳杆菌HM-09的种子培养及其固态发酵培养；

其特征在于，所述固态发酵培养方法为：固态发酵培养基上首先接种凝结芽孢杆菌HM-09种子液，接种量为2.0-8.0%，控制发酵温度30-37℃,湿度60-85%，单菌发酵0-12h，再添加干酪乳杆菌HM-09，接种量为2.0-8.0%，其他条件不变，再发酵12-36h，共计发酵总时间为24-48h；

所述接种量单位为体积重量百分比；

所述凝结芽孢杆菌HM-09保藏编号为CGMCC No.6729，干酪乳杆菌HM-09保藏编号为CGMCC No.6736。

2.根据权利要求1所述凝结芽孢杆菌和干酪乳杆菌复合菌剂，其特征在于，所述种子培养条件：凝结芽孢杆菌HM-09于恒温箱中35-38℃，160-180转摇床培养20-24h；干酪乳杆菌HM-09于恒温箱中33-38℃培养20-24h；

所述种子培养基为：蛋白胨2-5%，葡萄糖2-5%，加水至100%，pH7.0-7.2。

3.根据权利要求1所述凝结芽孢杆菌和干酪乳杆菌复合菌剂，其特征在于，固态发酵培养基质量比例组成为：豆粕：麸皮：玉米粉=10:8-10:0.5-1，水份含量控制在40-75%，pH7.0-7.2。

4.根据权利要求1所述凝结芽孢杆菌和干酪乳杆菌复合菌剂，其特征在于，

所述种子培养条件：凝结芽孢杆菌HM-09于恒温箱中37℃，180转摇床培养24h；干酪乳杆菌HM-09于恒温箱中37℃培养24h；

所述固态发酵培养方法为：固态发酵培养基上首先接种凝结芽孢杆菌HM-09种子液，接种量为5.0%，控制发酵温度37℃,湿度80%，混菌培养12h；再添加干酪乳杆菌HM-09种子液，接种量为2.0%，其他条件不变，再发酵36h，共计发酵总时间为48h；

所述接种量单位为体积重量百分比；

所述种子培养基为：蛋白胨2%，葡萄糖5%，加水至100%，pH7.0-7.2；

所述固态发酵培养基质量比例组成为：豆粕：麸皮：玉米粉=10:10:0.5，水份含量控制在60%。

5.根据权利要求4所述凝结芽孢杆菌和干酪乳杆菌复合菌剂，其特征在于，发酵结束，凝结芽孢杆菌HM-09活菌数为2.48×10⁹cfu/g，干酪乳杆菌HM-09活菌数为3.50×10⁹cfu/g，游离氨基态氮含量达到500.2umol/g。

6.权利要求1-5任一所述益生菌制剂的制备方法，由凝结芽孢杆菌HM-09和干酪乳杆菌HM-09经种子培养及其固态发酵培养后，流化床干燥获得；其特征在于，

所述固态发酵培养方法为：固态发酵培养基上首先接种凝结芽孢杆菌HM-09种子液，接种量为2.0-8.0%，控制发酵温度30-37℃,湿度60-85%，单菌发酵0-12h，再添加干酪乳杆菌HM-09，接种量为2.0-8.0%，其他条件不变，再发酵12-36h，共计发酵总时间为24-48h；

所述接种量单位为体积重量百分比；

所述凝结芽孢杆菌HM-09保藏编号为CGMCC No.6729，干酪乳杆菌HM-09保藏编号为CGMCC No.6736。

7.根据权利要求6所述益生菌制剂的制备方法，其特征在于，所述种子培养条件：凝结芽孢杆菌HM-09于恒温箱中35-38℃，160-180转摇床培养20-24h；干酪乳杆菌HM-09于恒温箱中33-38℃培养20-24h；

所述种子培养基为：蛋白胨2-5%，葡萄糖2-5%，加水至100%，pH7.0-7.2。

8.根据权利要求6所述益生菌制剂的制备方法，其特征在于，所述固态发酵培养基质量比例组成为：豆粕：麸皮：玉米粉=10:8-10:0.5-1，水份含量控制在40-75%，pH7.0-7.2。